以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
快速瑞氏染液 |
| 250ml×3 | 1~3天 |
商品介紹:
瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。 操作步驟 1. (選做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室溫固定15-30 分鐘。 2. 吸去固定液,室溫通風(fēng)晾干。 3. 將試劑一滴加到載玻片上,均勻覆蓋住載片上血細(xì)胞,染色時(shí)間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢(shì)時(shí),迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。 4. 小股水流洗片,防止將大量的細(xì)胞從載片上沖落下來(lái)從而影響以后的觀察。30s 水洗結(jié)束后將載片放到陰涼處風(fēng)干。 5. 顯微鏡鏡檢。 染色結(jié)果 1. 紅細(xì)胞呈淺紅色,中央稍淡而略有蝶形態(tài)。 2. 白細(xì)胞系統(tǒng)清晰易分,細(xì)胞膜清晰呈紫黑色,細(xì)胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿中各種顆粒區(qū)分明顯。其中中性粒細(xì)胞漿中顆粒呈淡紫紅色,嗜酸粒細(xì)胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細(xì)胞胞漿中顆粒呈藍(lán)褐色。單核細(xì)胞的胞漿呈灰藍(lán)色,胞漿中顆粒呈細(xì)小淡紫紅色或藍(lán)紫色。淋巴細(xì)胞胞漿呈淡藍(lán)色。 注意事項(xiàng) 1. 推片:取全血3 微升左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移與血滴接觸,即可見(jiàn)血液沿推片下緣散開(kāi),再勻速沿載玻片平面向前滑動(dòng),至血液鋪完血膜為止。 2. 涂片時(shí)不要太厚也不要太薄,太厚紅細(xì)胞重疊并易皺,太薄時(shí)不易找到白細(xì)胞。 3. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否則染色時(shí)血膜易脫落。 4. 試劑一及二染液不能過(guò)少,以防很快蒸發(fā)引起染液沉淀。試劑一不可少于400 微升,試劑二是試劑一的1 倍量。滴加試劑一及二時(shí)要輕搖玻片或用洗耳球?qū)?zhǔn)血片吹氣,使染液充分混合。 5. 鏡檢時(shí)如果紅細(xì)胞偏藍(lán),請(qǐng)放在蒸餾水中1-3 分鐘,直至紅潤(rùn)為止。 6. 染色過(guò)淡,可復(fù)染。染色過(guò)深,可用水沖洗或浸泡,還可用75%乙醇脫色3-5 秒。 儲(chǔ)存:2~8℃,避光,有效期12個(gè)月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
伊維菌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Aucubin微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體包裝25g
依達(dá)拉奉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Metronidazole真核翻譯起始因子5抗體包裝5g
依法韋侖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Metronidazole遺傳性前列腺癌蛋白2抗體包裝25g
依那普利拉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 8-O-Acetylharpagide磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
依那普利雙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Chrysoobtusin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝25ml
依諾肝鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Myristicin磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5ml
依諾沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Kakuol染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體包裝100mg
依帕司他(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Asarinin上皮微管相關(guān)蛋白7抗體包裝1g
依普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Gitogenin堿性鞘磷脂7抗體包裝100g
依替膦二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Isoliquiritigenin表皮生長(zhǎng)因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝25g
依替米星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Isoliquiritigenin長(zhǎng)鏈脂肪延長(zhǎng)長(zhǎng)ELOVL6抗體包裝100g
*度(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ginsenoside Re酪蛋白激受體A6抗體包裝25g
*度(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ginsenoside F4酪蛋白激受體A3抗體包裝5g
*紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ginsenoside RK3酪蛋白激受體A7抗體包裝1g
*(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ginsenoside RH4酪蛋白激受體B1抗體包裝5g
腐皮鐮孢Fusarium│solani 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白試劑盒2,3,5,4’-四羥基二乙烯-2-O
: ATCC27562=DSM10143=NBRC15645=JCM3725=BCRC12905=CCRC12905=CECT529=CCUG13448資源名稱(chēng): 創(chuàng)傷弧菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,標(biāo)準(zhǔn)品糖皮質(zhì)激受體β試劑盒石吊蘭;Lysionotin
短芽孢桿菌Bacillus│pumilus 質(zhì)量規(guī)格:>900μg//mg,USP,BR糖皮質(zhì)激受體α試劑盒射干苷元;tectorigenin
快速瑞氏染液泡盛曲霉 反-2-己烯酸乙酯3氧-5β-類(lèi)固脫氫Elisa
惡臭假單胞 2-羥基-3-吡羧酸甲酯3α羥基類(lèi)固3-脫氫Elisa
條紋白蟻傘 3,6-二氯噠-4-3α羥基類(lèi)固脫氫Elisa
傘枝犁頭霉 4-溴-1H-吡咯-2-羧酸20α羥基類(lèi)固脫氫Elisa
米曲霉 [3-(二甲基氨基)基]三苯基磷溴化物氫鹽類(lèi)固21單加氧Elisa
炭黑曲霉 3-氨基-2-甲氧基吡啶-5-酸頻哪酯耳椎蛋白90Elisa
Actinomadura cellulosilytica 2-(2-吡啶基)異硫脲-N-氧化物鹽酸鹽trip13Elisa
大腸埃希氏 烯異噻唑P450膽固側(cè)鏈裂解Elisa
河生腸桿 5(6)-氨基熒光內(nèi)啡肽Elisa
網(wǎng)孢正青霉 氯羰基亞磺酰氯CORINElisa
白假絲酵母 1,2,4,5-環(huán)己烷四甲酸二酐髓樣分化因子88Elisa
冷溫木拉克酵母 5-乙基-4-羥基-2-甲基-3(2H)-呋喃酮甘油-3-磷酸脫氫抗體Elisa
卡莫納枝芽孢桿 L-環(huán)己基氨酸新型隱球抗體Elisa
黑曲霉 咪唑并[1,2-a]嘧啶基質(zhì)金屬蛋白1Elisa
地霉 反-4-氨基環(huán)己抗反應(yīng)蛋白7A域抗體Elisa