詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類(lèi)產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對(duì)于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱(chēng):牛莫拉氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng):Moraxella bovis
貨號(hào):GOY-M4217
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦骸⒁?、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶(hù)可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱(chēng)TaqMan PCR,后來(lái)也叫Real-Time PCR,是美國(guó)PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來(lái)的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來(lái)實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào),這樣我們就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線(xiàn)可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號(hào)階段,熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒(méi)有線(xiàn)性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
異喹啉物(標(biāo)準(zhǔn)品)56-82-6無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
異維A酸(標(biāo)準(zhǔn)品)59-51-810kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
異香草醛(標(biāo)準(zhǔn)品)1077-28-7多聚免疫球蛋白受體(PIGR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
異(標(biāo)準(zhǔn)品)1069-31-4S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
銦標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μG/ML,基體:1.0 mol/...20064S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
吲達(dá)帕胺(標(biāo)準(zhǔn)品)3130-87-8干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
吲哚布芬(標(biāo)準(zhǔn)品)617-45-8SATB同源框蛋白1(SATB1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
吲哚美辛(標(biāo)準(zhǔn)品)67-21-0乳酸脫酶C(LDHC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
熒光母素(標(biāo)準(zhǔn)品)443-80-1CUB帶狀瘡疹透明區(qū)樣域蛋白1(CUZD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
牛莫拉氏菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒熒光素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)616-06-8貓眼綜合征染色體區(qū)候選基因1(CECR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
右雷佐生;右亞胺(標(biāo)準(zhǔn)品)338-69-2生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(GAS6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
右旋蘭索拉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)28697-53-2信號(hào)素3E(SEMA3E)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
右佐匹克?。?biāo)準(zhǔn)品)5267-64-1抗凝血酶(AT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)大鼠25羥基維生素D3 Hederagonic acid
TRICAPRINGuinea pig IgG1 (Immunoglobulin G1) ELISA Kit
人抗胰島素受體抗體 Agatharesinol acetonide
TRIMETHYLAMINE HYDROCHLORIDEGuinea pig IgG2α (Immunoglobulin G2α) ELISA Kit
人抗胃壁細(xì)胞抗體 3-Deoxyzinnolide
IodotrimethylsilaneGuinea pig GPLD1 (Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1) ELISA Kit
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 印楝素
Betaine;Lycine;Glycocoll betaine;Glycine betaine;TriMethyl glycocoll anhydride;Oxyneurine;DiMethyl sarcosine;(CarboxyMethyl)triMethyl aMMoniuM hydrochloride inner salt;1-Carboxy-N,N,N-triMethylMethanaMiniuM inner salt;Betaine anhydrousGuinea pig CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前膠原肽 環(huán)桑色烯
(TRIMETHYLSILYL)METHYLLITHIUMGuinea pig VLA (Very Late Appearing Antigen) ELISA Kit
大鼠Ⅱ型膠原 Xanthoxyletin
Trimethylsilyl trifluoromethanesulfonateGuinea pig GKN2 (Gastrokine 2) ELISA Kit
相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單產(chǎn)品僅用于科研
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對(duì)定量方法之一。