詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。產(chǎn)品僅用于科研
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycoplasma haemocanis
貨號:GOY-M4263
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強度信號,這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
滇烏頭(標(biāo)準(zhǔn)品)8050-81-5防御素β126(DEFβ126)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
碘化木蘭花堿12027-38-2鈣黏蛋白26(CDH26)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
靛玉紅(標(biāo)準(zhǔn)品)63148-58-3Sideroflexin 5蛋白(SFXN5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
公藤(標(biāo)準(zhǔn)品)63148-62-9胞漿磷蛋白4(STMN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
烯基苯酞(標(biāo)準(zhǔn)品)9016-00-6Sideroflexin 2蛋白(SFXN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香(標(biāo)準(zhǔn)品)10108-87-9Sideroflexin 3蛋白(SFXN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)2082-84-0Sideroflexin 4蛋白(SFXN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香樹脂醇雙葡萄糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)9032-75-1防御素β127(DEFβ127)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香酸(標(biāo)準(zhǔn)品)10031-30-8Isthmin 1蛋白(ISM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
香葉(標(biāo)準(zhǔn)品)1338-23-4防御素β129(DEFβ129)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
酸東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)1304-29-6SHC-轉(zhuǎn)化蛋白4(SHC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
犬血支原體探針法熒光定量PCR試劑盒東風(fēng)桔(標(biāo)準(zhǔn)品)94-36-0矢車菊苷β5(CENTβ5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
東莨菪苷(標(biāo)準(zhǔn)品)110-05-4孤兒素磷酸酶1(PHOSPHO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)人抗紡錘體抗體 聚二醇200
NAGuinea pig PRB2 (Basic Salivary Proline Rich Protein 2) ELISA Kit
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 羥高鐵血紅素
TetrabutylaMMoniuMbroMideGuinea pig CK-17/KRT17 (Cytokeratin 17) ELISA Kit
小鼠肌紅蛋白 化釹
NAGuinea pig TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit
人抗角蛋白抗體 化鑭
TERPINEOL ANHYDROUS MIXTURE OF ISOMERSGuinea pig DPP6 (Dipeptidyl Peptidase VI) ELISA Kit
小鼠血栓素B2 無水化鈰
Solvent Red 23Guinea pig tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β 化鈰
Solvent Blue 35Guinea pig GSTθ1/GSTt1 (Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單產(chǎn)品僅用于科研
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。