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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：細(xì)胞存活率檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
細(xì)胞存活率檢測試劑盒是通過檢測細(xì)胞膜的完整性來檢測細(xì)胞的存活率。通常情況下細(xì)胞膜喪失即可認(rèn)為細(xì)胞研究死亡，本試劑盒中染料不能使正常健康保持完整細(xì)胞膜的細(xì)胞染色，而可以使細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞染色，通過顯微鏡下直接計數(shù)拍照后計數(shù)，就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行精確的定量。 儲存條件：2-8℃避光保存。 有效期：一年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
尼達(dá)明英文名稱： Carisoprodol緊密連接蛋白8抗體包裝1g
洛莫司汀英文名稱： Carisoprodol磷化半胱蛋白9抗體包裝25g
嗎替麥考酚酯/霉酚酯英文名稱： Carvedilol磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
美登DM1英文名稱： Carvedilol磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝2g
美英文名稱： Cediranib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g
咪唑立賓英文名稱： Celecoxib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝5g
米替福新英文名稱： Celecoxib磷化p21蛋白抗體包裝1g
米托蒽醌英文名稱： Chlortetracycline HCl磷化p21蛋白抗體包裝5g
莫特塞尼英文名稱： Chlortetracycline HCl8號染色體開放閱讀框84抗體包裝1g
奈達(dá)鉑;順糖鉑英文名稱： Cilostazol磷化p21蛋白抗體包裝5g
奈拉濱英文名稱： Cilostazol磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體包裝100g
尼羅替尼英文名稱： Cisplatin CLEC2D蛋白抗體包裝1g
帕唑帕尼英文名稱： Cisplatin 富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝5g
帕唑帕尼鹽鹽英文名稱： Cisplatin 醌氧化還原樣蛋白1抗體包裝100g
培美曲塞二鈉英文名稱： Cladribine銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝25g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,USP胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1試劑盒鹽羅格列;Rosiglitazone
分枝枝頂孢Acremonium│furcatum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島樣生長因子2受體試劑盒鹽吡格列;Pioglitazone
泛菌屬Pantoea│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>850mcg/mg,BR胰島樣生長因子2試劑盒藥根堿;Jatrorrhizine
細(xì)胞存活率檢測試劑盒枯草芽孢桿 2,5-二氟-3-血管非炎性蛋白2Elisa
新疆糖絲 4-氨基-2-氯-3-氟CD36分子Elisa
球孢白僵 3-三氟甲基-1H-5-氯吡唑磷脂酰肌1磷酸Elisa
禽腺病 四-(4-甲氧基苯)乙烯磷脂酰肌二磷酸Elisa
白布勒擔(dān)孢酵母 (9-苯基-9H-咔唑-2-基)酸基質(zhì)金屬蛋白抑制因子Elisa
粗柄白蘑 6-乙基吡啶-3-酸基質(zhì)金屬蛋白Elisa
球孢白僵 3-溴-4-異硫酸基苯血清肌肽Elisa
巴達(dá)維亞芽孢桿 6-溴-5-甲基-1H-吲唑胱天蛋白12Elisa
大腸桿 2-氨基-5-溴吡啶-4-羧酸鈣調(diào)蛋白激4Elisa
鐮刀（三七根際土壤） Meso-四(3,5-二溴-4-羥基苯基)卟啉基質(zhì)金屬蛋白6Elisa
魚肉中磺嘧啶、磺甲惡唑質(zhì)控樣品 聚-L-精氨酸巨病PP65抗原Elisa
Rhizobiales sp. 萘磺酸鈉載脂蛋白BElisa
尖孢鐮刀亞麻?；?/span> 十七烷內(nèi)聚合Elisa
植物內(nèi)芽孢桿 DA201大孔樹脂神經(jīng)生長因子受體Elisa
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 N-甲基氧基乙酸酯HIV (1+2) 抗原抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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