詳細介紹
商品介紹:
用途: 變色酸2R和亮綠SF聯(lián)合染色法 注意事項: 染色結(jié)果為:髓鞘呈深紅色,軸索和間質(zhì)呈綠色,脫髓鞘纖維不著色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:髓鞘染色液(變色酸2R法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:4×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
仙鶴草(標準品)英文名稱: Nodakenin神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DPF1抗體包裝5g
仙鶴草酚B(標準品)英文名稱: CorynolineN-乙酰轉(zhuǎn)移8抗體包裝1g
仙茅(標準品)英文名稱: AstragalineN-乙酰轉(zhuǎn)移8B抗體包裝25g
仙茅苷(標準品)英文名稱: Palmitic acidNOMO蛋白抗體包裝5g
仙人掌(標準品)英文名稱: Vaccarin鈉離子轉(zhuǎn)運蛋白1抗體包裝1g
纖細薯蕷皂苷(標準品)英文名稱: Rosarin鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體包裝250mg
相思子(標準品)英文名稱: Rosin磷化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體包裝1g
相思子堿(標準品)英文名稱: AT7-519.HCl神經(jīng)穿透2抗體包裝5g
香草(標準品)英文名稱: Pelitinib (EKB-569)腦啡肽2抗體包裝1ml
香橙(標準品)英文名稱: TripdiolideA型流感病核蛋白抗體包裝5ml
(標準品)英文名稱: Sennoside C神經(jīng)粘附分子2抗體包裝1ml
香蜂草苷(標準品)英文名稱: Sennoside D巢蛋白1抗體包裝1g
香附(標準品)英文名稱: Dihydrocapsaicin痛覺調(diào)節(jié)肽NPFF抗體包裝5g
香加皮(標準品)英文名稱: Schizandrol B神經(jīng)緊張抗體包裝1g
香荊芥酚(標準品)英文名稱: SaikosaponinB1鼻咽上皮特異性蛋白1抗體包裝5g
串珠霉屬Monilia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR精脫羧試劑盒臭靈丹二;Pterodondiol
巴西毛殼Chaetomium│brasiliense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品精2試劑盒橙皮內(nèi)酯;Meranzin
毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng) 精試劑盒蒼術(shù)苷A;Atractyloside A
髓鞘染色液(變色酸2R法)香栓孔 6-氨基四甲基羅丹明神經(jīng)營養(yǎng)因子4Elisa
耐鹽考克氏 5-氨基四甲基羅丹明神經(jīng)特異性烯化Elisa
地下鹽單胞 甲基環(huán)戊烯酮腎Elisa
蘇云金芽孢桿 哈喹諾腎上腺Elisa
殼 維生 B6腎上腺髓質(zhì)Elisa
變粉紅鎖擲孢酵母 3-(4-叔丁基苯基)2-甲基腎損傷分子1Elisa
腐皮殼 戴氏合金生存Elisa
類干酪乳桿 三異基硅基三氟甲磺酸酯生長Elisa
金黃色葡萄球 N-乙基鄰(對)甲苯磺酰生長釋放肽Elisa
紅色雷夫松氏 蔗糖鐵生長抑制Elisa
水生拉恩氏 對叔戊基生長停滯基因6Elisa
博韋環(huán)紋炭團 叔丁氧羰基-D-2,4-二氨基丁酸生長抑Elisa
釀酒酵母 N-乙基對甲苯磺酰視黃酸Elisa
大腸埃希氏桿 洛索洛芬鈉嗜環(huán)蛋白;親環(huán)AElisa
中國木霉 2-氟-α-氧代-苯乙嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1Elisa