商品介紹:
用途: 用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以及組織和細(xì)胞的組織化學(xué)染色,多用于轉(zhuǎn)基因植物的GUS基因表達(dá)。 注意事項(xiàng): 染色原理是適宜的反應(yīng)條件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍(lán)色物質(zhì),該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì),具有GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn),可用肉眼或顯微鏡觀察到。 儲存條件:-20℃,避光,12個(gè)月 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
GUS染色液 |
| 100ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
黑曲霉艾滋病病復(fù)制結(jié)合蛋白抗體Human KLHL21 ELISA Kit小鼠胎盤泌乳(PL)免疫試劑盒
紅菇屬AFP4b蛋白抗體Human KLHL22 ELISA Kit小鼠鎖鏈免疫試劑盒
泡盛曲霉HIV-1病復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠羧化不全骨鈣(ucOC)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠髓樣觸發(fā)性受體2(TREM2)免疫試劑盒
梭菌心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠髓樣分化因子88(MyD88)免疫試劑盒
楊生盾殼霉抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human KLHDC4 ELISA Kit小鼠髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體 免疫試劑盒
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體Human KLHL32 ELISA Kit小鼠髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體Human KLHDC5 ELISA Kit小鼠性磷(ACP)免疫試劑盒
白靈側(cè)耳雌二抗體Human KLHL29 ELISA Kit小鼠性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
黑曲霉淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體Human KLHL3 ELISA Kit小鼠性β葡萄糖苷(GBA)免疫試劑盒
蘋果黑腐皮殼淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體Human KLHDC3 ELISA Kit小鼠絲裂原激活的蛋白激/MAP激(Mapk1/Erk2/Mapk/Prkm1)免疫試劑盒
茄鏈格孢菌轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體Human Kindlin 2 ELISA Kit小鼠絲轉(zhuǎn)肽抑制劑Kazal type 3(SPINK3)免疫試劑盒
根瘤菌卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體Human KIR2DL3 ELISA Kit小鼠水通道蛋白9(AQP-9)免疫試劑盒
三葉草根瘤菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體Human KLHL31 ELISA Kit小鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫試劑盒
平菇載脂蛋白C3抗體Human KIR2DS4 ELISA Kit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)免疫試劑盒
: NBRC12714資源名稱: 凝結(jié)芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:Type I-S; from bovine submaxillary glands白介6受體試劑盒9-硝基
仁果叢梗孢Monilia│fructigena (Pers.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,EP白介6試劑盒香草
鏈格孢Alternaria│alternata (Fr.) Keissl. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介5受體alpha試劑盒雪松
GUS染色液枯草芽胞桿 2,2,2-三酯核糖核酸IgG抗體Elisa
蘋果鏈格孢 鹽酸米托蒽醌羥甲基戊二酸單酰Elisa
大腸埃希 4-甲氧基-3-硝基吡啶尿激型纖溶原激活物Elisa
盤長孢狀盤孢 甲基對甲苯砜鈣非依賴型磷脂A2Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 7-氟滿二酮磷酸化雷帕霉靶蛋白Elisa
卡利比克邁耶氏酵母 4,5-二甲基-1,2-苯二死骨片1Elisa
季也蒙畢赤酵母 4-甲基-2-甲氧基自噬基因Beclin 1Elisa
茶炭疽病 2-乙基己酸鹽自噬相關(guān)蛋白5Elisa
枯草芽孢桿 2',4'-二-5'-氟苯乙酮微管相關(guān)蛋白1A;1B輕鏈3BElisa
大腸埃希氏(大腸桿) 對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1Elisa
綠僵 3,5-二溴-2-羥基磷酸化乙酰Elisa
矩圓黑盤孢 2,4-二羥基苯甲酰鞘磷脂合成1Elisa
科羅拉多擬無枝酸 3-乙?;姿峄阴t然疎lisa
釀酒酵母 氟苯咪唑硝基還原Elisa
灰色鏈霉灰色亞種 2-甲基-2-戊烯酸血紅加氧Elisa