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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 13:17:30瀏覽次數(shù)：305
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T|50T|100T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9686 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：20T|50T|100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針?？梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，488nm 激發(fā)時(shí)的大發(fā)射波長為590nm，可以產(chǎn)生紅色熒光，在流式圖上表現(xiàn)為FL1和FL2雙陽性；在線粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí)JC-1為單體，488nm 激發(fā)時(shí)大發(fā)射波長為527nm，可以產(chǎn)生綠色熒光，形成流式圖中所有細(xì)胞FL1均為陽性。凋亡細(xì)胞則大多為FL1 單陽性。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來衡量線粒體去極化的比例。 通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測指標(biāo)。 線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化，可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測。試劑盒染料與其他的陽離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123 相比，特異性更高，對(duì)線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化，對(duì)線粒體去極化檢測的檢測一致性更好；紅綠色熒光強(qiáng)度比率只受線粒體膜電位的變化，不受線粒體大小，形狀，密度的差異干擾；檢測靈敏度強(qiáng)，對(duì)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別； 儲(chǔ)存條件：JC-1-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。 有效期：一年。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
達(dá)拉濱磷酯英文名稱： Baclofen趨化因子受體D6抗體包裝5g
尿嘧啶,5-脲嘧啶,5-尿嘧啶英文名稱： Balofloxacin Dihydrate鈣穩(wěn)態(tài)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白抗體包裝1g
維司群英文名稱： Balofloxacin DihydrateCHES1蛋白抗體包裝5g
枸櫞托瑞米芬英文名稱： Bendamustine HCl哺乳動(dòng)物性幾丁質(zhì)抗體包裝100mg
紅杉,西曲依英文名稱： Bendamustine HCl幾丁質(zhì)結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g
環(huán)孢D英文名稱： Betamethasone嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體包裝25g
吉莫斯特;吉美嘧啶英文名稱： Betamethasone幾丁質(zhì)1抗體包裝5g
吉西他濱英文名稱： Biapenem白抗原CD97 alpha 抗體包裝100mg
蝶呤英文名稱： Biapenem緊密連接蛋白2抗體包裝100mg
蝶呤二鈉鹽英文名稱： Bilibubin緊密連接蛋白7抗體包裝1g
啶鉑,吡鉑英文名稱： Bilibubin2號(hào)染色體開放閱讀框53抗體包裝5g
長春瑞賓/重長春瑞賓英文名稱： Bivalirudin TFA2號(hào)染色體開放閱讀框54抗體包裝25g
長春質(zhì)堿英文名稱： Bimatoprost2號(hào)染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
卡鉑英文名稱： Bimatoprost2號(hào)染色體開放閱讀框61抗體包裝100g
卡博替尼 ;XL184英文名稱： Bleomycin A5 Hydrochloride 癌相關(guān)抗原抗體包裝25g
黃色長孢鏈霉菌Streptomyces│longisporoflavus 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%胰島樣因子3試劑盒異茴芹;Isopimpinellin(
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7試劑盒異土木香內(nèi)酯;Isoalantolact
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5試劑盒7-乙基-10-羥基;7-Ethy
JC-1線粒體膜電位檢測試劑盒銅綠假單胞 4-(三氟甲基l)芐基異酸酯ARHGAP4Elisa
奧氏蜜環(huán) 1-甲基-1H--5-LYNElisa
三葉草根瘤 叔丁基二甲基羥乙氧基硅烷a2-6半乳糖的唾液酸寡糖Elisa
哈薩克斯坦酵母屬 (S)-N-BOC-3-甲基啉α2,6-半乳糖唾液酸Elisa
少孢根霉 4-(2-甲氧基乙基)嗎啉三苯氧Elisa
膠孢 6-氯-1H-吡咯并[3,2-b]吡啶尿Elisa
圍小叢殼 1-[3-(二氟甲氧基)苯基]乙酮游離皮質(zhì)Elisa
紅紫青霉 N-CBZ-2-甲胃動(dòng)蛋白2Elisa
巴斯德畢赤酵母 6-氯-2-氟-3-甲氧基分泌性熱休克蛋白90Elisa
黃桿 2-氨基-5-甲氧基吡啶20羥二十碳四烯酸Elisa
牛瘟病 6-溴-2-氯-8-環(huán)戊基-5-甲基-吡啶并[2,3-D]嘧啶-7(8H)-酮19羥二十碳四烯酸Elisa
蘇云金芽胞桿蠟螟亞種 [1,3-雙(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亞基][[2-[2-氧代氧基]苯基]亞甲基]二氯西尼羅病抗體Elisa
Escherichia 1-(3,4-二基)哌西尼羅病抗原Elisa
水生黃桿 4-氯-3-甲5,6-EETElisa
金色鏈霉 2,4-二氯-5-氟8,9-EETElisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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