詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
PEDF 色素上皮衍生因子ELISA Kit | PEDF ELISA Kit | GOY-E99919 |
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬:大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
性能:
1) 準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2) 靈敏度:檢測濃度小于1.0 pg/ml。
3)特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4) 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5) 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6) 有效期:6個月
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
乳糖發(fā)酵管 20支
Korser氏肉湯 20支
MR-VP 20支
蛋白胨水(色氨酸肉湯) 20支
衛(wèi)矛醇半固體 20支
山梨醇發(fā)酵管 20支
丙二酸鹽 20支
水楊苷發(fā)酵管 20支
賴氨酸脫羧酶肉湯 20支
氨基酸脫羧酶對照 20支
西蒙氏枸櫞酸鹽 20支
棉子糖發(fā)酵管 20支
甘露醇發(fā)酵管 20支
七葉苷 20支
PEDF 色素上皮衍生因子ELISA KitCK2 細胞角蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
GLUT8 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml
GABARAPL1 γ氨基丁酸受體相關(guān)蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Histone H2B 組蛋白H2B抗體 規(guī)格: 0.1ml
HSD11B1/HSD1 羥基類固醇脫酶11β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
DRD2 多巴胺受體D2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-NFKB p65(Ser276) 磷酸化細胞核因子NF-κB p65抗體 規(guī)格: 0.1ml
TNF-alpha(1F6) 瘤壞死因子-α單克隆抗體 規(guī)格: 0.1ml
ATP citrate lyase/ACLY 三磷酸檸檬酸裂解酶抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-NPM (Thr199) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Rb(Ser249) 視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 磷酸化叉蛋白3A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HSL (Ser863) 磷酸化荷爾蒙敏感脂肪酶抗體 規(guī)格: 0.1ml
RASL/RASL10A Ras樣蛋白家族10A抗體 規(guī)格: 0.2mlAdenylosuccinate Lyase 苷酸琥珀酸裂解酶抗體 規(guī)格: 0.2ml
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。