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詳細介紹
商品介紹：
阿爾瑪藍（Alamar Blue）是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸亮度變化和熒光信號。這是一種安全無毒的染料，可用于細胞活性和細胞增殖的定量分析以及細胞因子生物測定和體外細胞毒性研究，能有效測定動物、真菌和細菌細胞的天然代謝活性。Alamar Blue在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，反映所研究的細胞或微生物對氧分子的消耗，因而常被用作氧化還原指示劑，以顯示被觀察細胞和細菌的代謝活動。這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉換成熒光和比色指示劑的能力。在細胞增殖過程中，細胞內NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性，因此對應的信號較低?？梢杂闷胀ǚ止夤舛扔嫽驘晒夤舛扔嫏z測，其激發(fā)光波長在530-560 nm之間，發(fā)射光波長為590 nm。吸光度和熒光強度與活性細胞數(shù)成正比。 本品可廣泛地用于細胞增殖代謝，藥物的細胞毒作用的體外測定以及病原微生物的的快速檢測與鑒定。 與臺盼蘭、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的優(yōu)勢。Alamar Blue采用單一試劑，可以連續(xù)、快速地檢測細胞的增生狀態(tài)。由于Alamar Blue對細胞無毒、無害，不影響細胞的抗體合成與分泌等活性，因此可以對同一批細胞的增生狀態(tài)進行連續(xù)觀察和進一步的實驗觀察，因此有操作簡便和幾乎不干擾細胞正常代謝的特點。 注意事項 1）需客戶自行準備100%還原型Alamar Blue試劑。為得到還原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue與細胞培養(yǎng)基的混合溶液，Alamar Blue與細胞培養(yǎng)基的比值為1:10，高壓滅菌15min。（不能對濃縮的Alamar Blue高壓滅菌，也不能用PBS配制溶液，因為100%還原型Alamar Blue在PBS中不穩(wěn)定。） 2）為得到結果，建議實驗前先摸索孵育時間和接種細胞數(shù)量。 3）合適密度的細胞可以增加檢測靈敏度。對于96 孔板，我們建議每孔接種100 微升細胞，細胞濃度范圍為：貼壁細胞在100-10,000/孔，懸浮細胞在2,000-50,000/孔，并以培養(yǎng)基為空白對照。對于384 孔板，細胞濃度和接種量均減半。 4）整個過程均應為無菌操作，因為微生物污染物同樣可以還原檢測試劑而影響實驗結果。 5）注意接種細胞濃度和加入檢測試劑后孵育時間。細胞濃度過高或孵育時間過長，會導致繼發(fā)性還原反應，產(chǎn)生無色和熒光消失。 6）孵育時，須避光。 7）本產(chǎn)品可以使用熒光或分光光度計檢測，但熒光的靈敏度高，實驗誤差小，推薦使用熒光檢測。 儲存條件：4℃，有效期一年 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：阿爾瑪藍
英文名稱：Alamar Blue
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
腭/肺/鼻上皮癌關聯(lián)蛋白(PLUNC)英文名稱：PLUNC ELISA Kit19號染色體開放閱讀框80抗體包裝100g
多效生長因子(PTN)英文名稱：PTN ELISA Kit半胱雙加氧1抗體包裝25g
多配體蛋白聚糖1(SDC1)英文名稱：SDC1 ELISA Kit膠原蛋白11A2抗體包裝5g
多聚免疫球蛋白受體(PIGR)英文名稱：PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗體包裝1g
多聚蛋白2(MMRN2)英文名稱：MMRN2 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框103抗體包裝5g
多功能肽2(LMP2)英文名稱：LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗體包裝25g
多功能蛋白聚糖(VS)英文名稱：VS ELISA Kit促腎上腺皮質激釋放激結合蛋白抗體包裝5g
多巴胺轉運蛋白(DAT)英文名稱：DAT ELISA Kit3號染色體開放閱讀框23抗體包裝1g
多巴胺受體D4(DRD4)英文名稱：DRD4 ELISA Kit瓜環(huán)肽抗體包裝25g
多巴胺受體D3(DRD3)英文名稱：DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗體包裝5g
多巴胺受體D1(DRD1)英文名稱：DRD1 ELISA Kit鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝1g
多胺氧化(PAOX)英文名稱：PAOX ELISA Kit磷化鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激4抗體包裝25g
對氧磷2(PON2)英文名稱：PON2 ELISA Kit膠原蛋白4a2亞基抗體包裝5g
對氧磷1(PON1)英文名稱：PON1 ELISA KitCD161c抗體包裝100g
端粒關聯(lián)蛋白1(TEP1)英文名稱：TEP1 ELISA Kit補體C1r鏈多肽抗體包裝25g
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品孕激/孕試劑盒野馬追內酯A;Eupalinolide
: ivcas7.01221資源名稱: 蕈狀芽胞桿菌 質量規(guī)格：>97%,進分sigma貨號A3656 鑰孔蟲戚血藍蛋白試劑盒乙氧基白屈菜紅堿; 5-Ethoxych
: 65092442資源名稱: 羊布氏菌 質量規(guī)格：>99%,BR鑰孔蟲戚血藍蛋白試劑盒異夏佛塔苷;Isoschaftoside
阿爾瑪藍水單胞 4-哌酪氨酸抗體Elisa
鏈格孢 2-氧化-6-甲酸甲酯酪氨酸Elisa
枯草芽孢桿 2-[[叔丁氧羰基]甲基氨基]發(fā)熱伴血小板減少綜合征Elisa
香蕉 磺酰磺視神經(jīng)蛋白Elisa
密蘇里游動放線 磺磺隆p62Elisa
大腸埃希氏 S-3-BOC-氨甲基吡咯烷S100鈣結合蛋白A8Elisa
類干酪乳桿 N,N-二甲基-4-((E)-4-((E)-(4-硝基亞芐基)氨基)苯乙烯基)苯普列克底物蛋白Elisa
管毛殼 2-Boc-六氫吡咯并[3,4-c]吡咯前纖維蛋白1抗體Elisa
鏈霉屬 3,5-二溴-4-羥基吡啶14-3-3家族z蛋白Elisa
淡紫紫霉 alpha-溴-2-氯可替寧Elisa
黃色直絲鏈霉 4-氟-3-甲氧基溴芐甘膽酸Elisa
黑木耳 4-氯噻吩[2,3-D]嘧啶阿法骨化Elisa
假單胞 噻吩并[2,3-D]嘧啶-4(3H)-酮磷酸化p38絲裂原活化蛋白激Elisa
短小芽孢桿 羥乙磺酸噴他瞇縮宮Elisa
秦氏蜜環(huán) 4-甲硫基乙酯曼氏裂頭蚴IgG抗體Elisa
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