公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):HIF-2α抑制劑(HIF-2α-IN-1)
英文名稱(chēng):HIF-2α-IN-1
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|25mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
HIF-2α-IN-1是一種HIF-2α抑制劑,IC50值小于500nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1799948-06-3 純度:99.45% 分子式:C??H?F?NO?S 分子量:405.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
豬丹絲菌Ki67蛋白抗體Human PLCD3 ELISA Kit銜接蛋白活化因子1(APAF1)ELISA Kit
釀酒酵母離子通道蛋白EAG1抗體Human PLCD4 ELISA Kit?;囸I(AG)ELISA Kit
蘇云金芽胞桿菌轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體Human Plexin B2 ELISA Kit酰化激蛋白(ASP)ELISA Kit
盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維母生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶(FGFR1OP)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維母表面抗原(FSP)ELISA Kit
異常漢遜酵母磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體Human PLCD4 ELISA Kit纖維連接相關(guān)抗原(FRA)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human Plexin B2 ELISA Kit纖維連接蛋白(FN)ELISA Kit
大腸埃希菌AEG-1抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維介蛋白(fgl2)ELISA Kit
桔青霉白介6抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維膠凝蛋白3(FCN3)ELISA Kit
小單孢菌低密度脂蛋白抗體Human PLCH1 ELISA Kit纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA Kit
金黃色葡萄球菌LRRC19蛋白抗體Human PLCL2 ELISA Kit纖維蛋白原α鏈(FGA)ELISA Kit
麥根腐平臍蠕孢層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4F ELISA Kit纖維蛋白原(Fb)ELISA Kit
粉紅鐮刀菌層粘連蛋白受體1單克抗體Human PLA2G4E ELISA Kit纖維蛋白溶(PL/Fbn)ELISA Kit
盔形畢赤酵母T活化連接蛋白抗體Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纖維蛋白(Fibrin)ELISA Kit
弗雷德里克斯堡假單胞菌LIX1抗體Human PLAC1L ELISA Kit纖調(diào)蛋白(FMOD)ELISA Kit
單格孢屬凝集樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體Human PLAGL2 ELISA Kit纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)白樺脂
球孢白僵菌Beauveria│bassiana 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T)棗仁皂苷D
玉蜀黍赤霉(麥類(lèi)赤霉病菌)Gibberella│zeae 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)棗仁皂苷B
HIF-2α抑制劑(HIF-2α-IN-1)CK18 角蛋白18抗體(C端)L-絲氨酯鹽鹽 98%
CK18 角蛋白18抗體L-酪氨酯 98%
CK14/17/42/10 角蛋白14抗體L-酪氨酯鹽鹽 98%
CK15 角蛋白15抗體L-酪氨芐酯對(duì)苯磺鹽 98%
CK16 角蛋白16抗體L-纈氨芐酯對(duì)苯磺鹽 98%
CK17 角蛋白17抗體L-纈氨酯鹽鹽 99%
Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 化角蛋白17抗體N-芐氧羰-L-蘇氨 98%
CK19 角蛋白19抗體N-芐氧羰-L-脯氨 98%