缺氧誘導(dǎo)因子-1α抑制劑(HIF-1α)(PX-478)公司*的產(chǎn)品：HAI-1(Hepatocyte Growth Factor Activator Inhibitor 1) 肝生長(zhǎng)因子激活物抑制因子抗原6-溴-2-吡啶 97%
HBA1(hemoglobin alpha 1) 人類血紅蛋白α1抗原6-溴-3-吡啶 96%
VWCE/URG11(von Willebrand fact

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：缺氧誘導(dǎo)因子-1α抑制劑(HIF-1α)(PX-478)

英文名稱：PX-478

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

香菇延伸突觸蛋白3抗體Human ZNF253 ELISA Kit雞熱休克蛋白40(HSP-40)免疫試劑盒

鴨疫里氏桿菌原纖維蛋白2抗體Human ZNF24 ELISA Kit雞熱休克蛋白27(HSP-27)免疫試劑盒

滑菇尤文肉瘤FLI1蛋白抗體Human ZNF251 ELISA Kit雞熱休克蛋白20(HSP-20)免疫試劑盒

鏈霉菌巖藻糖轉(zhuǎn)移1抗體Human ZNF256 ELISA Kit雞去甲腎上腺(NA)免疫試劑盒

土曲霉凋亡調(diào)節(jié)蛋白δ+γ抗體Human L1CAM(Neural cell adhesion molecule L1) ELISA Kit雞前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒

球毛殼菌叉頭蛋白O1/O3/O4抗體Human ZMAT2 ELISA Kit雞前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

嬰兒配方乳粉化物 微管相關(guān)蛋白FAM82B抗體Human ZIC4 ELISA Kit雞皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒

越南芽孢桿菌纖維蛋白原A鏈抗體Human ZNF134 ELISA Kit雞免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

鼠李糖乳桿菌FAS凋亡抑制分子1抗體Human PCGF6(Polycomb group RING finger protein 6) ELISA Kit雞免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

魯氏不動(dòng)桿菌FAS凋亡抑制分子2Human ZKSCAN3 ELISA Kit雞免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

針葉樹散斑殼表皮表面抗原1抗體Human ZIM3 ELISA Kit雞免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

固氮菌凝血因子9抗體Human ZNF140 ELISA Kit雞免疫核糖核(Irna)免疫試劑盒

粗皮馬勃凝血因子10抗體Human ZIP4 ELISA Kit雞馬立克氏病病(MDV)抗體(IgM)免疫試劑盒

釀酒酵母凝血因子11輕鏈抗體Human ZNF143 ELISA Kit雞馬立克氏病病(MDV)抗體(IgG)免疫試劑盒

紫紅曲霉凝血因子12重鏈抗體Human ZIP7 ELISA Kit雞卵轉(zhuǎn)鐵蛋白(OT)免疫試劑盒

蘇云金芽胞桿菌FIGNL1蛋白抗體Human ZKSCAN1 ELISA Kit雞卵清白蛋白免疫試劑盒

肺炎克雷伯菌肺炎亞種Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml，溶劑：齊墩果-3-O-β-D葡萄糖( 1→3

解淀粉芽孢桿菌解淀粉亞種Bacillus│amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3黃花敗醬甙C;牡丹草苷B

煙曲霉Aspergillus│fumigatus 質(zhì)量規(guī)格：100.0μg/g,基體: 0.5mol/L的HCl溶液五味子酚
缺氧誘導(dǎo)因子-1α抑制劑(HIF-1α)(PX-478)紅細(xì) Boc-O-芐基-D-蘇氨抗酸性磷酸Elisa

芥鏈格孢 N-Cbz-對(duì)氨基環(huán)己酮Ⅰ型膠原C末端肽Elisa

Bacillus anthracis N,O-1,3-二乙?；裥湍z原N末端肽Elisa

小弧 10-羥基癸酸多殺性巴氏桿Elisa

皺紋單胞 3-己炔-2-酮非變性二型膠原蛋白Elisa

側(cè)耳 叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯胃饑餓Elisa

疣孢漆斑 L-谷氨酸-γ-芐酯膽囊收縮;縮膽囊八肽Elisa

玉米大斑病 4'-乙氧基苯乙酮H9抗體Elisa

三色革裥 4-氨基-2-溴腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Elisa

冷桿屬 Zinc hexafluoroacetylacetonate hydrate,Zn(CF3COCHC網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病抗原Elisa

蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病抗體Elisa

相思根瘤 5-溴-2-甲酸乙酯血清白蛋白Elisa

沙雷氏 Cleviprex大腸桿病Elisa

波多野氏微桿 6-羥基-2-萘甲酸沙門氏Elisa

腓特烈斯堡分枝桿 順-4-羥基環(huán)己氨酸特丁酯新城疫病Elisa