微管動(dòng)力蛋白HSET變構(gòu)抑制劑（CW-069）公司正在出售的產(chǎn)品：HHV8/ORF K2/vIL-6/FITC 熒光標(biāo)記人類皰疹病8抗體IgG四 光譜級(jí), ≥99.5%
HHV8/ORF50/FITC 熒光標(biāo)記人類皰疹病8抗體IgG四 for HPLC, ≥99.9%
HHV8/ORF50/FITC 熒光標(biāo)記人類皰疹病8抗體IgG苯酐 98%
HHV8/ORF50/FITC 熒光標(biāo)記人類皰

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
嗜冷桿菌大鼠抗凝血受體Anti-POLR1C Antibody人心肌營養(yǎng)1(CT-1)

枯草芽孢桿菌人鐵蛋白Anti-POLR2E Antibody人心肌營養(yǎng)1(CT-1)

釀酒酵母小鼠血小板活化因子Anti-POLR2J Antibody人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)

匍枝根霉原變種人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白Anti-POLR2J Antibody人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)

豇豆慢生根瘤菌大鼠凝血受體Anti-POLR3B Antibody人熱休克蛋白90(HSP-90)

香菇小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白αAnti-POLR3A Antibody人熱休克蛋白90(HSP-90)

紅細(xì)菌屬小鼠肌球蛋白Anti-POLR3A Antibody人熱休克蛋白70(HSP-70)

釀酒酵母大鼠心肌肌鈣蛋白ⅠAnti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白70(HSP-70)

硬水黃桿菌人基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1Anti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白40(HSP-40)

大腸埃希菌人髓鞘堿性蛋白抗體Anti-POLR3D Antibody人熱休克蛋白40(HSP-40)

米曲霉大鼠磷肌3激Anti-POLR3E Antibody人熱休克蛋白20(HSP-20)

土壤黃桿菌小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類Anti-POLR3E Antibody人熱休克蛋白20(HSP-20)

擬青霉大鼠蛋白激BAnti-POLR3G Antibody人肌球蛋白(MYS)

香菇小鼠GATA結(jié)合蛋白4Anti-POLR3H Antibody人肌球蛋白(MYS)

釀酒酵母人組織多肽抗原Anti-POLR3H Antibody人凝溶膠蛋白(GS)

燼灰鏈霉菌人肺癌標(biāo)志物Anti-POM121 Antibody人凝溶膠蛋白(GS)

細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白2抗體摩洛哥芽孢桿菌乙鈣不動(dòng)桿菌

敏感性鉀離子通道蛋白抗體滑子蘑蠟狀芽孢桿菌

血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體黃白側(cè)耳表皮葡萄球菌

腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體銳齒櫟蛙眼摩氏摩根氏菌摩根亞種
微管動(dòng)力蛋白HSET變構(gòu)抑制劑（CW-069）尤氏泰勒蟲（定西株） N-芴甲氧羰基-N'-甲苯磺酰基-L-精

希瓦氏屬 叔丁氧羰基-甲苯磺?；?精

雞腿菇 雙(2-氧代-3-惡唑烷基)酰

嗜堿芽孢桿 DL-高胱

蒼白鹽八疊球 DL-高半胱硫酸內(nèi)酯鹽酸鹽

塔賓曲霉 ε-聚賴

玉蕈（真姬菇） 半胱氨酰甘

樟疫霉 L-胱硫

被孢屬 L-類胱

煙曲霉 S-腺甘蛋

大腸埃希 S-腺甘基蛋

惡臭假單胞 順式-D-羥脯

枯草芽孢桿 2-氨基-1-苯乙

天格爾黃桿 L-谷鹽

樹舌靈芝（可定） 甘叔丁酯鹽酸鹽