商品介紹:
Regorafenib(BAY73-4506)一水合物是多靶點(diǎn)抑制劑,對(duì)VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,PDGFR_beta_,Kit,RET和Raf-1的IC50分別為13nM,4.2nM,46nM,22nM,7nM,1.5nM和2.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1019206-88-2 別名:BAY 73-4506 monohydrate 純度:99.94% 分子量:500.83 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:多靶點(diǎn)抑制劑(Regorafenib monohydrate)
英文名稱:Regorafenib monohydrate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
玉米黑粉菌調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體Anti-PTPN1 Antibody甲基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)
甘家湖擬諾卡氏菌調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI2抗體Anti-PTP4A1 Antibody家族性地中海熱基因(MEFV)
變灰青霉信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體Anti-PTPN1 Antibody加溶金屬蛋白1(MP1)
Enhydrobacter aerosaccus Staley et al. 硒結(jié)合蛋白1抗體Anti-PTOV1 Antibody加帽2(DCP2)
芽胞桿菌屬SMAD家族9抗體Anti-PTPN1 Antibody脊椎蛋白2(SPON2)
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體Anti-PTPN11 Antibody脊椎蛋白1(SPON1)
蠟狀芽孢桿菌信號(hào)傳導(dǎo)T淋巴活化相關(guān)蛋白抗體Anti-PTPN11 Antibody脊柱后側(cè)凸肽(KY)
糞腸球菌唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集9抗體Anti-PTPN11 Antibody(PB0720)己糖激(KHK)
潮汐玫瑰變色菌心血管調(diào)節(jié)肽Salusin-α抗體Anti-PTPN22 Antibody己糖激2(HK2)
副球菌屬S100B蛋白抗體Anti-PTPN2 Antibody己糖激1(HK1)
小角狀節(jié)皮菌轉(zhuǎn)錄因子SOX-11蛋白抗體Anti-PTPRC Antibody幾丁質(zhì)3樣蛋白2(CHI3L2)
金黃桿菌屬纖溶原激活物抑制劑1 RNA結(jié)合蛋白抗體Anti-PTPN22 Antibody幾丁質(zhì)1(CHIT1)
空腸彎曲桿菌剪接因子,精/絲豐富19Anti-PTPRC Antibody集落激因子2受體β(CSF2Rβ)
斯氏油脂酵母可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體Anti-PTPRC Antibody集聚蛋白(AGRN)
分枝節(jié)桿菌S腺苷L-同型半胱水解抗體Anti-PTPN22 Antibody集鈣蛋白2(CASQ2)
pGAPZB磷化Smad2抗體Anti-PTPRC Antibody集鈣蛋白(CASQ)
神經(jīng)母細(xì)胞瘤源性分泌蛋白抗體脲氣球菌小鼠淋巴成纖維細(xì)胞提取物
核因子1B抗體黑色葡萄穗霉小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞提取物
維甲誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞瘤蛋白1抗體熱黃擬無(wú)枝菌小鼠卵巢成纖維細(xì)胞提取物
轉(zhuǎn)錄延伸因子NELF抗體Amycolatopsisalbidoflavus小鼠卵巢顆粒細(xì)胞提取物
多靶點(diǎn)抑制劑(Regorafenib monohydrate)大腸埃希 反式-橙花叔
紅色紅曲 亞太因
一品紅尾孢(一品紅褐斑?。?/span> 尾葉香茶菜戊
釀酒酵母 異牡荊黃
釀酒酵母 苯甲酰新烏頭原堿鹽酸鹽
貝氏葡萄座腔 脫氫樅
丁香直絲鏈霉 毛萼晶A
遲緩芽孢桿 β-常春藤
香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 偽石蒜堿
矩圓黑盤孢 去氫丹參新酮
白腐盾殼霉 脫水羊藿
白僵 鹽酸普羅托平; 鹽酸藍(lán)堇堿
大豆慢生根瘤 醉魚草皂甙IV
釀酒酵母 前胡
黃桿 銀杏酸C17:1