商品介紹:
E7449是PARP1和PARP2高效活性小分子抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1140964-99-3 純度:99.09% 分子量:317.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PARP1和PARP2抑制劑(E7449)
英文名稱:E7449
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蒙氏假單胞菌磷化信號轉導分子SMAD3抗體Anti-PTGER2 Antibody甲狀腺受體α(THRα)
乳鏈球菌4羥基壬烯抗體Anti-PTGER4 Antibody甲狀腺激自身抗體(THAA)
德氏乳桿菌神經(jīng)突出相關蛋白Slitrk1抗體Anti-PTGES3 Antibody甲狀腺激反應基因(THRSP)
峽灣嗜冷桿菌金黃色葡萄球菌菌體蛋白抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體2(PTHR2)
茄鐮孢骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體Anti-PTGS1 Antibody甲狀旁腺受體1(PTHR1)
酒紅鏈霉菌24脫氫膽固還原抗體Anti-PTGS2 Antibody甲狀旁腺激2(PTH2)
云芝栓孔菌(變色栓菌)膽鹽磺基轉移Anti-PTGS1 Antibody(PB0036)甲型肝炎病受體2(HAVCR2)
靈芝屬轉錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTH1R Antibody甲酰肽受體2(FPR2)
銅綠假單胞菌磷化轉錄因子SOX9蛋白抗體Anti-PTGS2 Antibody甲巰蛋白(TPN)
泰國葡糖桿菌磷化蛋白酪磷2抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊脫羧(MVD)
中慢生華癸根瘤菌長鏈脂肪連接抗體Anti-PTGS2 Antibody甲羥戊激(MVK)
油白蘑超氧化物歧化3抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫腺苷磷化(MTAP)
黃色單胞菌硫酯2蛋白抗體Anti-PTN Antibody甲硫酰肽2(METAP2)
寡氧單胞菌Rho GTP激活蛋白13抗體Anti-PTK2 Antibody甲硫酰肽1(METAP1)
蘇云金芽孢桿菌鉻瘤患者抑癌基因SDHB抗體Anti-PTN Antibody甲基多巴1β(MEP1β)
針葉散斑殼菌類固5α還原2抗體Anti-PTP4A2 Antibody甲基多巴1α(MEP1α)
煙酰胺腺嘌呤二核苷1抗體庫氏棒桿菌小鼠胰島細胞提取物
鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體Staphylococcuscarnosussubsp.carnosus小鼠甲狀腺上皮細胞提取物
核孔復合體蛋白抗體小片球菌小鼠胰腺上皮細胞提取物
嘌呤霉敏感性肽蛋白抗體麻疹孿生球菌小鼠乳腺上皮細胞提取物
PARP1和PARP2抑制劑(E7449)舌狀炭角 馬兜鈴內(nèi)酰BIII
美澳型核果褐腐病 反式-可母尼,濕地松
根霉 棕鱗矢車菊黃酮
蒼白色鏈霉 苦木西堿J
空腸彎曲桿 五脂A1
蘇云金芽胞桿柏氏變種 無根藤辛
香菇* 鵝掌楸堿
棒束青霉 異落新婦苷
湖北擬酵母 松柏苷; 松苷
秀珍菇 長春尼定
枯草芽孢桿 氧代表千金藤默星堿
巨大球座 梓6-咖啡酸酯
黏著劍(可訂) 洋槐黃
靈芝屬 香柑; 5-羥基-6,7-呋喃并
金黃色葡萄球金黃亞種 異皮啶7-O-beta-D-葡萄糖苷