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α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法

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  • α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法

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更新時(shí)間:2022-04-13 17:00:09瀏覽次數(shù):424

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號 GOY-01S6572 主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法的銷售產(chǎn)品:鹽美卡因Human
鹽帕他莫Human, Mouse
鹽哌維林Human
鹽氮卓斯汀Human, Mouse
鹽地芬尼多Human, Mouse
鹽丁卡因Human, Mouse, Rat
化接頭蛋白

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱:α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法

規(guī)格:50管/48樣

測試方法:紫外分光光度法

分類:三羧酸循環(huán)系列

貨號:GOY-01S6572

客戶自備儀器和試劑

商品介紹:

測定意義

α-KGDH(EC 1.2.4.2)廣泛存在于動物、植物微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中,是三羧酸循環(huán)調(diào)控關(guān)鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰輔酶。

測定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和輔酶生成琥珀酰輔酶、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

特點(diǎn):

1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成

2、靈敏度高,操作便捷

3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑

儀器:

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測定波長為550nm)

2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)

3、臺式離心機(jī)

4、漩渦混勻器

5、微量移液器

QQ截圖20220307153443.png 

 

樣品測定的準(zhǔn)備:

1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :

細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。

組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。

2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。

3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。

小鼠顆粒A(Gzms-A)試劑盒牛角藥勺9,9-二辛-2,7-二溴芴 97%咪唑 99%

小鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒不銹鋼藥刮9,9-二己-2,7-二溴芴 97%4-咪唑 98%

小鼠淋巴趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒不銹鋼藥鏟3-癸噻吩 98%1,2-苯并異噻唑啉-3- 98%

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒稱量紙9,9-二-2,7-二溴芴 98%2, 2’-二硫代二苯 98%

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)試劑盒稱量紙3,4-二氧噻吩 97%三乙酯 99%

小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒稱量紙2,7-二溴芴 98%三酯 99%

小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒玻璃比色皿二苯并噻吩 99%菲 97%

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒玻璃比色皿[1,1'-雙(二苯膦)二茂鐵]二化鈀  Pd  14.5% L-a-氨己二 98%

小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒石英比色皿2,7-二溴芴 96%過氧化鈉 ACS reagent, ≥93.0%

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒微量比色皿雙(三苯膦)二化鈀(Ⅱ) Pd 15.2%硫辛 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒黑體比色皿1,2-二(二苯膦)乙烷二化鈀(II)  Pd  18.5% 黃芪皂苷 III  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠素(Renin)試劑盒熒光比色皿9,9-二氧雜蒽 97%黃芪皂苷 II  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠素(Renin)試劑盒PH廣泛試紙二茂鐵 98%黃芪總皂苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠α2抗纖溶(α2-AP)試劑盒PH精密試紙9-芴 97%黃芪皂苷I 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠α2抗纖溶(α2-AP)試劑盒PH精密試紙3-正十六烷噻吩 97%鹽黃連 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%

小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)試劑盒PH精密試紙3-己噻吩 98%野百合 分析標(biāo)準(zhǔn)品
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法猴促血管生成素1(ANG1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨-5-溴吡啶傳染性支氣管炎病拉丁屬名: Rhizopus sp.

猴白介素11(IL-11)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨-5-吡啶根霉屬的菌拉丁屬名: Hericium erinaceus

猴抑瘤素M受體(OSMR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨-5-吡啶猴頭菌用途: 代謝產(chǎn)物具有弱抗菌活性。

猴腫瘤蛋白p63(TP63)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨-5-吡啶色褐鏈霉菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

猴胃泌素34(GT-34)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 1,3-環(huán)硫酯*美味牛肝菌拉丁屬名: Lentinula  edodes

猴神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,3-環(huán)硫酯香菇用途: 產(chǎn)不飽和脂肪

N-乙酰半乳糖-6-硫酯(GAS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1,3-環(huán)硫酯魯氏毛霉拉丁屬名: Penicillium implicatum

BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒間溴氟苯糾纏青霉用途: 科研

猴免疫球蛋白G Fc段低親和力受體IIIa(FcγR3A)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 間溴氟苯腐皮鐮孢拉丁屬名: Crebrothecium ashbyii

猴微精蛋白β(MSMβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒間溴氟苯阿舒多囊霉拉丁屬名: Purpureocillium lilacinum

猴增殖相關(guān)蛋白2G4 (PA2G4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-苯肼鹽鹽淡紫紫霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

猴軸突生長誘向因子4(Ntn4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-苯肼鹽鹽玫紅假裸囊菌拉丁屬名: Candida  kefyr

猴游離三狀腺原氨(fT3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-苯肼鹽鹽乳酒假絲酵母拉丁屬名: Collimonas pratensis

猴腦鈉素/腦鈉肽(BNP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-(硫)苯酚山岡單胞菌拉丁屬名: Trichoderma harzianum

猴脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2(LCN2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-(硫)苯酚哈茨木霉用途: 與紫穗槐共生固氮

Smad同源物7 (Smad7/MADH7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 4-(硫)苯酚根瘤菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。


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