以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Empagliflozin是一種選擇性的鈉葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-2(SGLT-2)抑制劑,作用于hSGLT-2,IC50為3.1nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:864070-44-0 別名:BI 10773 純度:99.91% 分子量:450.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
戴爾根霉抗志賀大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀大腸桿菌O139)Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
泰國放線短鏈孢菌表皮生長因子抗體Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛脂酰脫氫免疫試劑盒
根瘤菌表皮生長因子抗體Human MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛脂酰合成免疫試劑盒
弗蘭克氏菌磷化真核翻譯延長因子2抗體Human DUPD1 (Dual specificity phosphatase DUPD1) ELISA KIT牛脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種真核延伸因子激2抗體Human ENDOD1 (Endonuclease domain-containing 1 protein) ELISA KIT牛脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒
賴芽胞桿菌屬磷化真核延伸因子激2抗體Human DNM1L (Dynamin-1-like protein) ELISA KIT牛脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒
中華靈芝(紫芝)真核啟動因子2α抗體(eIFα2)Human DNAAF1 (Dynein assembly factor 1, axonemal) ELISA KIT牛載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒
瓶形毛殼磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體Human ERAP1(Endoplasmic reticulum aminopeptidase 1) ELISA Kit牛孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
海洋桿菌真核翻譯延長因子2抗體Human EBP (3-beta-hydroxysteroid-Delta(8),Delta(7)-isomerase) ELISA KIT牛誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌癌基因ERG3抗體Human DUOX1(Dual oxidase 1) ELISA Kit牛游離纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒
特尼里弗諾卡氏菌豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體Human ENAM (Enamelin) ELISA KIT牛印度猬因子(IHH)免疫試劑盒
太平洋白單胞菌FAS凋亡抑制分子3抗體Human DSTYK (Dual serine/threonine and tyrosine protein kinase) ELISA KIT牛乙酰羧化合成(ACC)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌纖維束1抗體Human DUSP3 (Dual specificity protein phosphatase 3)ELISA KIT牛乙酰(acetyl-CoA)免疫試劑盒
交鏈孢屬叉頭蛋白P3抗體Human EMCN (Endomucin) ELISA KIT牛胰高血糖樣肽1(GLP-1)免疫試劑盒
瓦克青霉免疫球蛋白G Fc段受體IHuman MAT2A(S-adenosylmethionine synthase isoform type-2) ELISA Kit牛胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP-7)免疫試劑盒
釀酒酵母叉頭蛋白M1抗體Human ENDOU (Poly(U)-specific endoribonuclease) ELISA KIT牛胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)羊藿
溫哥華假單胞菌Pseudomonas│vancouverensis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異戊二烯
土曲霉Aspergillus│terreus Thom 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)異皮啶
SGLT-2抑制劑(Empagliflozin)美他環(huán),烯土霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g
美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amlodipine白球蛋白樣受體-B抗體包裝500g
美雄諾龍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NizatidineCD33L抗體包裝100g
門冬胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g
蒙脫石(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g
孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fludarabine唾液結(jié)合性球蛋白樣凝集5抗體包裝1g
咪喹莫特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g
咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g
咪唑煙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
米格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml
米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g
米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g
米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml
米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml
米替福新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g