公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:NLR受體家族NLRP3抑制劑(MCC950 sodium)
英文名稱:MCC950 sodium
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
MCC950(CP-456773)鈉鹽是NLR受體家族NLRP3高效特異性抑制劑,IC50值為7.5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):256373-96-3 別名:CP-456773 sodium;CRID3 sodium salt 純度:99.40% 分子量:426.46 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
升麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Panaxadiol肌收縮蛋白MYOT抗體包裝25g
升麻苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Panaxatriol磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g
升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Compound K環(huán)指蛋白59抗體包裝25g
生脈提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F1磷化絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體包裝5g
勝紅薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside F2羥戊激抗體包裝5g
圣草次苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb1羥戊脫羧抗體包裝1g
圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb2胞漿蘋果1抗體包裝5g
蓍草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rb3組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝1g
十七碳酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rc微絲相關(guān)蛋白3樣抗體包裝250mg
石菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rd微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白包裝100g
石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gliquidone單酰甘油脂肪抗體包裝25g
石吊蘭英文名稱: Gliquidone致癌基因n-Myc抗體包裝25g
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rf多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體包裝5g
石斛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ginsenoside Rg1線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體包裝1g
石見(jiàn)穿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 20(R)Ginsenoside Rg2蛋白激MST2抗體包裝25g
: =KCTC22802=CCUG58402資源名稱: 海黃桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)抗SSB/La抗體ELISA Kit丁香油;Clove oil
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品抗SS-A/Ro抗體ELISA Kit大黃酚;Chrysophanol;Chr
: AS2.1386資源名稱: 熱帶假絲酵母 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR抗SSA/Ro抗體 ELISA Kit大豆苷元;Daidzein
NLR受體家族NLRP3抑制劑(MCC950 sodium)質(zhì)金屬蛋白-1(小鼠抗原)八角蓮(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
中腦核仁蛋白1(抗原)八角麻(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
中腦核仁蛋白2(抗原)巴豆(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
一種應(yīng)激分子抗原巴豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)巴戟天(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
多藥耐藥相關(guān)蛋白1(抗原)巴利森苷A;派立辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
肺耐藥相關(guān)蛋白(抗原)巴西蘇木(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
間皮(多肽抗原)芭蕉根(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
MSH2抗原菝葜皂苷元,知母皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat