polo-like kinase1(PLK1)抑制劑（TAK-960）公司正在出售的產(chǎn)品：Mouse serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit 小鼠絲氨/蘇氨蛋白縮二脲 用于化肥分析，≥99.0%
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit 小鼠乳脫氫硝鋇 AR,99.5%
Mouse red cell

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
香菇核突觸蛋白-α抗體（N端）Anti-PSMA2 Antibody間隙連接蛋白40(CX40)

香蕉5脂氧合激活蛋白抗體Anti-PSEN2 Antibody間隙連接蛋白37(CX37)

擬莖點(diǎn)霉14-3-3 protein ζ/δ抗體Anti-PSMA4 Antibody間隙連接蛋白31(CX31)

巨型艾美耳球蟲硫軟骨多糖核心蛋白抗體Anti-PSMA1 Antibody(PB1143)間隙連接蛋白26(CX26)

釀酒酵母膽固?；D(zhuǎn)移1抗體Anti-PSMA3 Antibody(PB1145)間生蛋白1(MSGN1)

青霉屬沉默調(diào)節(jié)蛋白5抗體Anti-PSME2 Antibody假尿苷合7(PUS7)

平菇葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體Anti-PTBP1 Antibody假尿苷合3(PUS3)

卷柄根霉脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Anti-PTBP2 Antibody假尿苷合10(PUS10)

非洲馬瘟?。?/span>II型）電壓門控鈉通道5α抗體Anti-PTCH1 Antibody假尿苷合1(PUS1)

托姆青霉因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白2抗體Anti-PTCH2 Antibody中間小電導(dǎo)鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)

綠色木霉S100A1抗體Anti-PTCH2 Antibody協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(KCC4)

特臘帕尼鹽紅菌磷鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-PTEN Antibody協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(KCC3)

茶樹(shù)菇因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白3抗體Anti-PTCRA Antibody協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(KCC2)

綠木霉信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體Anti-PTEN Antibody蛋白(KALRN)

托姆青霉陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體Anti-PTF1A Antibody甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1(TITF1)

松口蘑泛連接Siah2Anti-PTGER1 Antibody甲狀腺受體β(THRβ)

N-乙酰轉(zhuǎn)移8B抗體斯氏普羅威登斯菌小鼠淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物

NOMO蛋白抗體Patulibacteramericanus小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞提取物

線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體新疆溶桿菌小鼠淋巴內(nèi)皮細(xì)胞提取物

尼曼匹克C2前體蛋白抗體耳葡萄球菌小鼠腸巨噬細(xì)胞提取物
polo-like kinase1(PLK1)抑制劑（TAK-960）擬郎比可假絲酵母 乙酰桉樹(shù)

腸桿屬 異紅花八角

圈卷產(chǎn)色鏈霉 梓甙

灰綠犁頭霉 野馬追內(nèi)酯K

類芽孢桿 9-羥基-13E-賴百當(dāng)烯-15-酸

單胞 異木香酸甲酯

異常威克漢姆酵母 Cuniloside B

異常漢遜酵母 七葉膽皂甙

木霉 雙去甲氧基姜黃

假單胞 (+)-花旗松

紅色鹽幾何形 防己諾林堿; 粉防己乙; 漢防己乙; 去甲粉防己堿

構(gòu)巢曲霉 DL-薄荷

玫瑰單胞 1-咖啡?？鼘幩?/span>

釀酒酵母 6-(beta-D-吡喃葡萄糖氧基)水楊酸甲酯

蘑菇屬 靈芝萜酮二