公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):TOPK抑制劑(OTS-964)
英文名稱(chēng):OTS-964
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
OTS964是一種有效的TOPK抑制劑,IC50為28nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1338545-07-5 純度:98.08% 分子量:428.97 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
枯草芽孢桿菌表面蛋白Sp17抗體Anti-GOLGA2 Antibody周期M2(CCNM2)
釀酒酵母新朊蛋白抗體(C端)Anti-GORAB(SCYL1BP1) Antibody周期M1(CCNM1)
pDC315上皮鈉通道β抗體Anti-GP2 Antibody周期L2(CCNL2)
平菇磷化上皮鈉通道β2抗體Anti-GPC3 Antibody周期L1(CCNL1)
硬毛栓孔菌磷化上皮鈉通道β2抗體Anti-GOLPH3 Antibody周期K(CCNK)
地衣芽孢桿菌S100B蛋白抗體Anti-GPCR TGR5/GPBAR1 Antibody周期J(CCNJ)
枝狀枝孢跨膜蛋白Sema3C抗體Anti-GPD1L Antibody周期I2(CCNI2)
蠟蚧輪枝孢肌漿/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP2抗體Anti-GPER1 Antibody周期I(CCNI)
桔青霉信號(hào)感應(yīng)增殖相關(guān)蛋白1抗體Anti-GPI Antibody周期H(CCNH)
紅色紅曲菌多配體蛋白聚糖1抗體Anti-GPI Antibody周期G2(CCNG2)
枯草芽孢桿菌沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體Anti-GPNMB Antibody周期G(CCNG)
耐低溫薄層菌感覺(jué)神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體Anti-Granzyme A/GZMA Antibody周期F(CCNF)
金黃色葡萄球菌突觸結(jié)合蛋白4抗體Anti-GPX4 Antibody周期E2(CCNE2)
木賊鐮孢凋亡基因抗體Anti-GRB10 Antibody周期E(CCNE)
釀酒酵母特異表達(dá)新基因5抗體Anti-GRB10 Antibody周期D3(CCND3)
釀酒酵母溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體Anti-GPX1 Antibody(PB0205)周期D2(CCND2)
S100P結(jié)合蛋白抗體布雷正青霉人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
SAMD14抗體微細(xì)正青霉人血管內(nèi)皮細(xì)胞
絲合并蛋白3抗體腫瘤差異表達(dá)蛋白紅色籃狀菌人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
Smad核轉(zhuǎn)錄共抑制因子抗體赭鮭色正青霉人大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
TOPK抑制劑(OTS-964)茶樹(shù)菇 2-巰基吡啶-N-氧化物 鋅鹽ATPElisa
生假絲酵母 二溴化鈀脂肪酸結(jié)合蛋白2Elisa
日本根霉 N-(基硅烷基)乙酰連蛋白Elisa
雪白紅鏈霉 3--2,2-二甲基-1-嘔吐Elisa
尖孢鐮孢 乙酰酮銅二磷酸腺苷Elisa
氣球?qū)?/span> N-氟苯磺酰亞一磷酸腺苷Elisa
釀酒酵母 鈣/Ca/1000µg/ml ;銨/NH4+/400µg/ml ;、鈉、美/K, Na, Mg/2甘氨酸脒基轉(zhuǎn)移Elisa
豬丹絲 4-(基硅基)嗎啉白介28Elisa
環(huán)狀芽孢桿 磷酸根、硫酸根/PO43- , SO42-/200µg/ml ;溴、硝酸根/Br-, NO3-/10白介29Elisa
釀酒酵母 1,2-二(4-吡啶基)乙烯帶絳蟲(chóng)IgG抗體Elisa
孢籃狀 砷、鑭、鋰、錳、鉬、鎳、鈧、鈉/As, La, Li, Mn, Mo, Ni, Sc, Na/20µ血小板活化因子Elisa
大腸埃希氏 正己烷中硫丹溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)抗弓形蟲(chóng)IgG抗體Elisa
亮白曲霉 2--3-氨基-4-成纖維生長(zhǎng)因子23Elisa
黑木耳(8808) 化學(xué)需氧量/COD支原體Elisa
亮白曲霉 基乙酸異酯谷氨酰合成Elisa