產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):ATM激酶抑制劑(KU-60019)
英文名稱(chēng):KU-60019
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
KU-60019是一種ATM激酶特異性的抑制劑,IC50為6.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):925701-46-8 純度:99.27% 分子量:547.67 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
綠色糖單孢菌外基質(zhì)磷化抗體Human HPSE(Heparanase) ELISA Kit尿游離皮質(zhì)(UFC)
枯草芽孢桿菌肥大蛋白7抗體Human MRAS ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU/ALB)
白僵菌微管相關(guān)蛋白4抗體Human MRE11 ELISA Kit尿微量白蛋白(MAU)
普通變形桿菌26S蛋白調(diào)節(jié)亞型7抗體Human MRI1 ELISA Kit尿微量白蛋白(ALB)
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種蛋白酪磷非受體型4抗體Human MRFAP1 ELISA Kit尿相關(guān)蛋白C(UreC)
墳?zāi)构?jié)桿菌腦腸肽O?;D(zhuǎn)移抗體Human MRM1 ELISA Kit尿嘧啶核苷磷化1(UPP1)
水生黃桿菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體Human G6PD(Glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase) ELISA Kit尿激型纖溶原激活因子(uPA)
費(fèi)氏中華根瘤菌髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體Human OPRM1(Mu-type opioid receptor) ELISA Kit尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)
長(zhǎng)雙歧桿菌T淋巴成熟相關(guān)蛋白抗體Human MPP3 ELISA Kit尿激型纖溶原激活物(uPA/PLAU)
串珠鐮孢甲基二尿癥cblA抗體Human TLR9(Toll-like receptor 9) ELISA Kit尿激型纖溶原激活物(uPA)
黃海鞘盒菌非平滑肌肌球蛋白2A抗體Human MPPE1 ELISA Kit尿激型纖溶原激活劑受體(uPAR)
枯草芽胞桿菌枯草亞種DNA修復(fù)甲基磺敏感性基因19抗體Human MOGAT2 ELISA Kit尿激(UK)
針葉樹(shù)散斑殼19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框28抗體Human MOGAT1 ELISA Kit尿肌酐(UCR)
醬油曲霉珠蛋白1抗體Human MOK ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移(UGCG)
露濕漆斑菌肌紅蛋白抗體Human MPPED1 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移2(UGT2)
節(jié)桿菌錯(cuò)配修復(fù)蛋白6抗體Human MPPED2 ELISA Kit尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移1(UGT1)
黑根霉Rhizopus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白果內(nèi)酯
長(zhǎng)枝木霉Trichoderma│longibrachiatum Rifai 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR銀杏內(nèi)酯C
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR銀杏內(nèi)酯B
ATM激酶抑制劑(KU-60019)摩氏摩根 2-氟苯酮凝血因子VElisa
葡萄座腔 4-氟-3-硝苯凝血因子ⅦElisa
華根霉 4-氟-2-硝苯凝血因子ⅧElisa
乙假絲酵母 4-氟-2-甲凝血因子ⅨElisa
水生拉恩氏 甲酸-4-硝基芐酯凝血因子ⅩElisa
根瘤 2-氨基-5-三氟甲苯流感病抗體Elisa
解蛋白弧 2-溴-4,6-二氟苯流感病H3N2亞型Elisa
Lonsdalea quercina subsp. quercina 2-氟-1,3-二甲苯新孢子蟲(chóng)病抗體Elisa
德曼鏈霉 3-氟-1,2-二甲苯血管舒緩激肽Elisa
康寧木霉 二糠基二硫α平滑肌肌動(dòng)蛋白Elisa
橄欖色青霉 酚紅白介31Elisa
巴氏醋桿 正丁基酸解脲支原體抗體Elisa
盤(pán)孢屬 1,3,5-苯??偰懼酔lisa
香菇 α-安息香肟膽汁酸Elisa
泡盛曲霉 呋喃-3-甲鉤端螺旋體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)