公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PIKfyve抑制劑(YM-201636)
英文名稱:YM-201636
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
YM-201636是高效選擇性的PIKfyve抑制劑,IC50值為33nM。YM-201636也抑制p110α,IC50為3.3μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:371942-69-7 純度:98.88% 分子量:467.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
谷棒桿菌分泌型白蛋白抑制因子抗體Anti-PRDX4 Antibody接觸蛋白3(CNTN3)
紙葡萄穗霉2,4-二氧乙(除草劑)單克抗體Anti-PRDX4 Antibody(PB0416)接觸蛋白2(CNTN2)
米曲霉尿轉(zhuǎn)運型糖蛋白抗體Anti-PRDX3 Antibody(PB0349)接觸蛋白1(CNTN1)
美澳型核果褐腐病菌雌激誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)制器抗體Anti-PRDX5 Antibody酵母脫氫(SCCPDH)
短桿狀馬賽菌14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亞型抗體Anti-PRDX5 Antibody(PB0417)窖蛋白3(CAV3)
南非諾卡氏菌2,4-二氧乙(除草劑)抗體Anti-PRF1 Antibody窖蛋白2(CAV2)
乳球菌屬5-羥色受體1A抗體Anti-PRDX6 Antibody(PB0350)窖蛋白(CAV1)
擬無枝菌5羥色抗體Anti-PRG2 Antibody角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰(TGM1)
泡盛曲霉5-羥色受體1B抗體Anti-PREB Antibody角鯊烯單加氧(SQLE)
黑曲霉神經(jīng)突觸2抗體Anti-PRKAB1 Antibody角膜蛋白(KERA)
熒光假單胞菌環(huán)指蛋白142抗體Anti-PRKAA1 Antibody角化粒(CDSN)
樹舌靈芝突觸結(jié)合蛋白3抗體Anti-PRKAB2 Antibody角化蛋白(CNFN)
蘇云金芽孢桿菌突觸相關(guān)蛋白25抗體Anti-PRKAR1A Antibody角化不良蛋白(DKC)
鐮刀菌因子信號傳導(dǎo)抑制蛋白1抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白9(KRT9)
枯草芽孢桿菌超氧化物歧化1抗體(銅/鋅過氧化物歧化SOD)Anti-PRKCB Antibody角蛋白81(KRT81)
蟻巢傘屬超氧化物歧化2抗體Anti-PRKCA Antibody角蛋白8(KRT8)
神經(jīng)肽S受體1/G蛋白偶聯(lián)受體154抗體Microlunatusphosphovorus小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體蜂房類芽孢桿菌小鼠膀胱成纖維細(xì)胞提取物
分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體唐菖蒲伯克霍爾德菌小鼠前列腺上皮細(xì)胞提取物
核受體0相關(guān)蛋白B家族2抗體變化考克氏菌小鼠膀胱上皮細(xì)胞提取物
PIKfyve抑制劑(YM-201636)奶酪假絲酵母 澤瀉B乙酸酯絲裂原活化蛋白激Elisa
森林曲霉 Lupiwighteone胰島樣生長因子Elisa
栗疫 偽異沙蟾精促脂Elisa
黑曲霉 皂草苷; 皂草黃苷阿黑皮原Elisa
單胞屬 Dodoviscin I?;撬酔lisa
健強地霉 Royleanone尾加壓IElisa
大麗花輪枝孢(棉花黃萎病) 正庚肟黑色代謝Elisa
盤孢 cis-MoschamineDNA甲基轉(zhuǎn)移1Elisa
木木霉 乙酸-[2-(4-辛基苯基)]乙DNA甲基轉(zhuǎn)移3AElisa
鏈格孢屬 Nb-FeruloyltryptamineDNA甲基轉(zhuǎn)移3BElisa
單增李斯特氏 乙酸-[2-(4-辛?;交?]乙酯甲基胞嘧啶雙加氧Elisa
大孢小孢酵母 Tataramide B維生B6Elisa
金針菇(黃) 1-茚滿鏈球抗體Elisa
玫煙色棒束孢 Nothofagin短鏈脂肪酸Elisa
金黃殼囊孢 Fischeria A組織蛋白AElisa