公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Btk抑制劑(ONO-4059 analog)
英文名稱:ONO-4059 analog
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
這個產(chǎn)品是ONO-4059的類似物,ONO-405是一種高效的選擇性Btk抑制劑,IC50值為sub-nM級。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1351635-67-0 純度:99.62% 分子量:456.5 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
惡臭假單胞菌大鼠糖原磷化同工MMAnti-PLA2G4C Antibody人血管生成4(ANG-4)
灰綠鏈霉菌小鼠水通道蛋白1Anti-PLA2G4E Antibody人血管生成4(ANG-4)
枯草芽孢桿菌人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-ablAnti-PLA2G1B Antibody人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
平滑假絲酵母人膀胱腫瘤抗原Anti-PLAGL1 Antibody人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)
鏈霉菌小鼠水通道蛋白0Anti-PLCG1 Antibody人熱休克因子1(HSF-1)
蘇云金芽胞桿菌大鼠糖原磷化同工BBAnti-PLA2G4D Antibody人熱休克因子1(HSF-1)
雞傷寒沙門氏菌小鼠水通道蛋白2Anti-PLCB3 Antibody人血管活性肽抑制劑(VPI)
釀酒酵母大鼠甲狀腺抗體Anti-PLD1 Antibody人血管活性肽抑制劑(VPI)
杉葉散斑殼(都不提供)人中期因子Anti-PLCG2 Antibody人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)
間型假絲酵母大鼠抗促甲狀腺受體抗體Anti-PLCXD1 Antibody人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)
突尼斯葉桿菌人BH3結構域凋亡誘導蛋白Anti-PLD4 Antibody人缺血修飾白蛋白(IMA)
大豆慢生根瘤菌小鼠甲狀腺球蛋白Anti-PLEKHG4 Antibody人缺血修飾白蛋白(IMA)
康寧木霉小鼠抑制AAnti-PLGRKT Antibody人8-異構前列腺F2α(8-epi-PGF2α)
鏈霉菌大鼠兒茶Anti-PLG Antibody人8-異構前列腺F2α(8-epi-PGF2α)
彩色豆馬勃人B淋巴瘤因子2Anti-PLG Antibody人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)
蚜蟲莫氏黑粉菌大鼠白介27Anti-PLK5 Antibody人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復合體(VE-cad)
粘液樣脂肪肉瘤蛋白FUS1抗體球毛殼霉腦膜炎奈瑟菌
血小板源性生長因子A相關蛋白2抗體平田頭菇10-2人毛囊角質(zhì)細胞
腫瘤壞死因子配體超家族成員13抗體燕麥嗜菌西瓜亞種大鼠脊髓前角運動神經(jīng)元瘤細胞
T細胞白血病同源盒蛋白3抗體葡萄炭疽刺盤孢菌人白血病細胞耐藥株
Btk抑制劑(ONO-4059 analog)柔嫩艾耳球蟲 對葉百部堿三鹽
賴芽胞桿屬 松脂二甲
巨獸芽孢桿 Thonningianin A
鼠李糖乳桿 麥冬內(nèi)酯A
膜醭畢赤酵母 桐堿
西蕃蓮莖基腐病 柴胡皂苷F
鐮刀屬 14-hydroxy sprengerinin C
枯草芽孢桿 松苓新酸
解硫類芽孢桿 異紫花前胡內(nèi)酯
鐘器腐霉 慈溪麥冬皂苷A
弗雷德里克斯堡假單胞 麥冬苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷
果生鏈核盤 葛根-6″-O-木糖苷
嗜中溫寒冷桿 連翹酯苷E
谷棒桿 葛根芹菜糖苷
斑污擬盤多孔孢 西伯亞遠志糖A6