詳細(xì)介紹
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
商品介紹:
產(chǎn)品簡介: 瑞氏染色液(即用型)是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,主要用于血液和骨髓涂片、細(xì)菌等染色。 儲存條件:室溫密封保存。 有效期:一年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
黃精(制)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Niobium standard磷化GATA結(jié)合蛋白2抗體包裝1g
黃連(三角葉黃連)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nickel Standard磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體包裝25g
核苷英文名稱: Potassium standard磷化GATA結(jié)合蛋白4抗體包裝5g
黃芪(蒙古黃芪)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium SolutionGATM蛋白抗體包裝25g
黃芪(膜莢黃芪)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Praseodymium standardγ1基丁受體GABAA Rβ1抗體包裝5g
黃芪苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ruthenium solutionG蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝1g
黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhodium solution過氧化1包裝5g
黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Rhenium standard粒-巨噬克激因子抗體包裝1g
黃芪皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Silicon dioxide solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白抗體包裝5g
黃芪紫檀烷苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Silver standard癌雌激調(diào)控蛋白GREB1抗體包裝1g
黃芪總黃英文名稱: Silver standard生長分化因子9抗體包裝250mg
黃芪總皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Scandium standard3-磷甘油脫氫抗體包裝1g
黃杞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Samarium standard生長分化因子15/巨嗜抑制因子1抗體包裝5g
黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tin standardG蛋白偶聯(lián)受體GPR91蛋白抗體包裝1g
黃芩苷(80%)英文名稱: Tin standard葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體包裝5g
雞痘病毒Avipoxvirus│Fowlpox virus 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%熱穩(wěn)定抗原試劑盒輔Q10;Ubidecarenone;
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:含量測定缺血修飾白蛋白試劑盒菝葜皂苷元;Sarsasapogenin
皺環(huán)球蓋菇Stropharia│rugosoannulata Farl. ex Murrill 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR犬尿試劑盒蟛蜞菊內(nèi)酯;wedelolactone
瑞氏染色液(即用型)紅色紅曲 辛基異羥肟酸可溶性Aβ寡聚體Elisa
Erwinia aphidicola 4-(N,N-二甲基)苯溴化鎂溶液抗球蛋白Elisa
燕麥狀曲霉 Val-Thr可溶性FMS樣酪氨酸激1Elisa
間胞囊 4-氯-2-甲基-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶絲狀血球凝集Elisa
白蘑菇 (2S,3S)-(+)-2,3-雙(二苯基膦基)雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯FK506結(jié)合蛋白8Elisa
白地霉 (R)-1,4-苯并二噁烷-2-甲酸Ring1和YY1結(jié)合蛋白Elisa
冬菇 氯代三叔丁基磷化金(I)外核苷三磷酸二磷酸水解2Elisa
白色鹽多孢 二氯[(±)-BINAP]二金(I)LIM半胱氨酸豐富域蛋白1Elisa
紫色團(tuán)胞鏈霉 水解乳蛋白絲氨酸;蘇氨酸激26Elisa
運(yùn)動節(jié)桿 3'-氨基-2',3'-雙脫氧鳥苷甘露糖結(jié)合凝集2Elisa
粘孢白僵 偶氮胂IARMC6Elisa
釀酒酵母 4,4'-二苯基-1,1'-聯(lián)萘-5,5'-二磺酸二鹽分裂周期因子42Elisa
運(yùn)動節(jié)桿 柳酸葉酯蛋白激BαElisa
產(chǎn)黃青霉 砷甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)溶液環(huán)指蛋白5Elisa
藍(lán)伏革 Merocyanin 540無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員7AElisa