商品介紹:
Allylthiourea能選擇性抑制氨的氧化。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:109-57-9 別名:Thiosinamine;N-Allylthiourea 分子式:C?H?N?S 分子量:116.18 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:氨氧化抑制劑(Allylthiourea)
英文名稱:Allylthiourea
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
香栓菌Hib乙酰水解抗體Human MUC20(Mucin-20) ELISA Kit大鼠Bκ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)免疫試劑盒
少根根霉原變種腫瘤異常甲基化蛋白1抗體Human SKAP2 ELISA Kit大鼠Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫試劑盒
芽孢桿菌腫瘤異常甲基化蛋白2抗體Human SIGMAR1 ELISA Kit大鼠B-淋巴趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌缺氧誘導(dǎo)因子脯酰羥化4抗體Human SIL1 ELISA Kit大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒
少根根霉人內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病膜糖蛋白2抗體Human SIKE1 ELISA Kit大鼠Bcl-2樣蛋白1(Bcl2-L-1/Bcl-X)免疫試劑盒
蟲草Beta基己糖苷beta亞基蛋白B鏈抗體Human SHOX ELISA Kit大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)免疫試劑盒
黃曲霉HEXIM2蛋白抗體Human SIM2 ELISA Kit大鼠Apelin(APLN)免疫試劑盒
松果鏈霉菌3'-5'外切1蛋白抗體Human SHMT2 ELISA Kit大鼠apelin 13(AP13)免疫試劑盒
黑馬朗假絲酵母型肝炎病NS5B抗體Human SHROOM1 ELISA Kit大鼠apelin 12(AP12)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體Human SH3GL3 ELISA Kit大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)免疫試劑盒
間型假絲酵母HEG同源蛋白1抗體Human MUC20(Mucin-20) ELISA Kit大鼠ADM2(ADM2)免疫試劑盒
雷丸菌人腫瘤抑制蛋白抗體Human SHANK1 ELISA Kit大鼠8異前列腺F2α(8-iso-PGF2a)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌蠟螟亞種Hemk甲基轉(zhuǎn)移家族1號蛋白抗體Human SH3GL2 ELISA Kit大鼠8異前列腺(8-iso-PG)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Hemk甲基轉(zhuǎn)移家族2號蛋白抗體Human SH3PXD2A ELISA Kit大鼠8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒
石楠炭疽病菌HEN1甲基轉(zhuǎn)移同源蛋白1抗體Human SHARPIN(Sharpin) ELISA Kit大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒
白假絲酵母缺氧誘導(dǎo)基因2蛋白抗體Human SHD ELISA Kit大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)免疫試劑盒
產(chǎn)堿假單胞菌Pseudomonas│alcaligenes 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%原花青B2
沃氏富鹽菌Haloferax│volcanii 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%澤瀉B醋酯
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%肉豆蔻木脂
氨氧化抑制劑(Allylthiourea)phospho-ATR/ACTR(Ser428) 化ATR抗體羥酰 98%
ATP7B 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體三油甘油酯 99%
ATP1b2/Na+K+ATPase 鈉ATP通道蛋白抗體戊二酰 97%
Phospho-Na,K-ATPase alpha-1 (Tyr10) 化鈉ATP蛋白a1抗體甘草次(α型) >98%
Phospho-ATP1A1 ( Ser16) 化鈉ATP蛋白a1抗體N-(γ-L-谷氨酰)-1-萘 BR
Phospho-ATP1A1(Ser23) 化鈉ATP蛋白a1抗體L-甘油鈣鹽,一水 97%
ATXN1 失調(diào)癥蛋白1抗體DL-甘油 90%
phospho-ATP citrate lyase(Ser455) 化三腺檸檬裂解抗體甘氨脫氧膽 97%