詳細介紹
商品介紹:
BTS是鈣離子刺激的肌球蛋白S1ATP酶抑制劑(IC50為5μM),能可逆地阻斷滑行運動。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1576-37-0 別名:N-Benzyl-p-toluenesulfonamide;N-Tosylbenzylamine 純度:99.57% 分子量:261.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
BTS | 1mL(10mM)|500mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
糙皮側耳人高分子量角蛋白Anti-PIGX Antibody人血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)
禾谷鐮刀菌小鼠磷脂A2Anti-PIKFYVE Antibody人血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)
變異棒桿菌大鼠抗增殖核抗原抗體Anti-PIP4K2B Antibody人血管緊張Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)
芽孢桿菌人肝癌抗原Anti-PIP5K Antibody人血管緊張Ⅱ受體Ⅰa型(AgtrⅠa)
普通鏈霉菌人凋亡蛋白激活因子1Anti-PIP5K1A Antibody人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)
根瘤菌小鼠組織因子途徑抑制物Anti-PIP5K1C Antibody人血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)
抗輻射不動桿菌大鼠脂蛋白脂Anti-PIPOX Antibody人α肌動蛋白(α Actin)
豬屎豆根瘤菌大鼠抗性磷5bAnti-PKIB Antibody人α肌動蛋白(α Actin)
枯草芽孢桿菌小鼠水通道蛋白5Anti-PITX1 Antibody人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)
戊糖片球菌人鼻咽癌Anti-PJA2 Antibody人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)
豬丹絲菌小鼠水通道蛋白4Anti-PKMYT1 Antibody人瘦受體(LEPR)
黃色短桿菌大鼠葡萄糖依賴性胰島釋放多肽Anti-PITPNB Antibody人瘦受體(LEPR)
德氏乳桿菌德氏亞種人膀胱癌抗原Anti-PKIA Antibody人血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)
黑曲霉小鼠水通道蛋白3Anti-PKNOX2 Antibody人血管緊張Ⅱ受體2(AT2R)
大腸埃希菌大鼠糖原磷化同工IIAnti-PKP4 Antibody人血管緊張Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)
紅霉鏈霉菌人廣譜角蛋白Anti-PLA1A Antibody人血管緊張Ⅱ受體1(ANGⅡR-1)
環(huán)指蛋白HCG1抗體橙鱗傘9人NK/T細胞淋巴瘤細胞
甲狀腺激受體α1抗體肉色栓菌豬小腸上皮細胞
甲狀腺激受體α1+α2抗體干巴菌3豬回腸上皮細胞
脂滴相關蛋白TIP47抗體光硬皮馬勃大鼠冠狀動脈平滑肌細胞
肌球蛋白S1ATP酶抑制劑(BTS)矩圓黑盤孢 α-硫代甘油
橄欖色盾殼霉 諾酮
大腸埃希 化纈草
橘色硬皮馬勃 6''-二酸沙苑子苷單酯
栗疫 異莪術烯
巨大芽孢桿 β-乙酰氧基異戊酰阿寧
雙孢菇 異去甲蟛蜞菊內(nèi)脂
膠孢 莪術烯
芽孢桿屬 莪術二烯酮
紫蓋蜜環(huán) 二酰染料木苷
緊密枝頂孢霉 PinocemP-O-(3''-galloyl-4'',6''-(S)-hexahydroxydip
唾液乳桿水楊亞種 川麥冬甘A
雙環(huán)林地蘑菇 福林
蘋果鏈格孢 1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-galactopyranosylracglyce
Hymenobacter chitinivorans 番茄堿