ALK激酶抑制劑(CH5424802鹽酸鹽)公司正在出售的產(chǎn)品：cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit 人環(huán)腺苷鋅 CP,99.0%
MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖結(jié)合凝集相關(guān)絲氨蛋白甘氨酰鹽鹽 98%
C

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

棉毛狀嗜熱霉血小板源性生長(zhǎng)因子AA+BB抗體Anti-ARSA Antibody白介2受體(IL2R)

釀酒酵母前列腺EP1受體抗體Anti-Arsb Antibody白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)

Albidiferax脯水解4抗體Anti-ASIC2 Antibody白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

釀酒酵母性核磷蛋白32家族B抗體Anti-ASIC2 Antibody白介29(IL-29)

矮小微桿菌程序性死亡2樣抗體Anti-ASIC1 Antibody白介28B(IL-28B)

乳酪短桿菌豬藍(lán)耳病病M蛋白抗體Anti-ASAH1 Antibody白介28A(IL-28A/IFN-λ2)

pMIR-Report Luciferase蛋白體PSMα3抗體Anti-ASIC2 Antibody白介27(IL-27)

三葉草根瘤菌蛋白體PRS10B抗體Anti-ASIC3 Antibody白介26(IL-26)

三葉草葉桿菌蛋白體PSMD3抗體Anti-ASL Antibody白介25(IL-25)

乳鏈球菌腦蛋白4抗體Anti-ASS1 Antibody白介24(IL-24)

缺陷短波單胞菌磷化蛋白體PSMα3抗體Anti-ASPH Antibody白介23受體(IL-23R)

大豆慢生根瘤菌抑癌蛋白DLP1Anti-ASXL1 Antibody白介23A(IL-23A)

土曲霉原變種蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移1抗體Anti-ASXL1 Antibody白介23(IL-23)

芽胞桿菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激1β/CaMKIβ抗體Anti-ATF1 Antibody白介22(IL-22)

慢生根瘤菌激-M2抗體Anti-ATF2 Antibody白介21(IL-21)

棒形小克銀漢霉原鈣粘蛋白β7抗體Anti-ATF1 Antibody(PB0098)白介2(IL-2)

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

產(chǎn)氣氣桿菌Aerobacter│aerogenes 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
ALK激酶抑制劑(CH5424802鹽酸鹽)球孢白僵 葡萄糖酸鹽凝血因子ⅩaElisa

深紅酵母 精氨酸雙水解（綠膿桿）糜蛋白Elisa

釀酒酵母 含青霉接觸皿培養(yǎng)基平板彈性蛋白Elisa

曲霉屬 志賀氏顯色培養(yǎng)基肝吸蟲Elisa

貝倫格葡萄座腔 AHM鑒別培養(yǎng)基肝吸蟲抗體Elisa

乳酸桿 2--4-氟苯甲肽聚糖Elisa

橙黃硬皮馬勃 大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）基質(zhì)金屬蛋白7Elisa

雅致放射毛霉 沙氏瓊脂培養(yǎng)基(SDA)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1Elisa

松口蘑 3-(三氟甲基)苯甲酰Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激Elisa

美澳型核果褐腐病 硝18%甘油(DG18)瓊脂基質(zhì)金屬蛋白7Elisa

Subsaxibacter arcticus 2,3,4,5,6-五氟苯甲酰褪黑Elisa

短桿屬 30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5)巴氏桿抗體Elisa

耐酸乳桿 0.1%呂氏堿性美藍(lán)染色液多配體蛋白聚糖1Elisa

谷氨酸棒桿Ⅰ型 EC肉湯（含小導(dǎo)管）硫酸乙酰肝Elisa

Botryosphaeria obtusa 氨基乙縮二甲碳酸酐Elisa