公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:BTK抑制劑(GDC-0853)
英文名稱:GDC-0853
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
GDC-0853是一個(gè)強(qiáng)的和BTK抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1434048-34-6 純度:99.50% 分子量:664.8 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
側(cè)孢短芽孢桿菌鈣激活通道蛋白3抗體Human PNRC2 ELISA Kit胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)
枯草芽孢桿菌枯草亞種腎臟和腦蛋白抗體Human PODXL2 ELISA Kit胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)
灰葡萄孢(灰霉病菌)有絲分裂驅(qū)動蛋白樣2B抗體Human PODN ELISA Kit胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)
卷枝毛霉詹森變型kelch樣蛋白9抗體Human POFUT1 ELISA Kit胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)
矮小青霉驅(qū)動蛋白家族成員15抗體Human POF1B ELISA Kit胸腺白血病抗原(TLa)
墻壁圣格奧爾根菌著絲點(diǎn)關(guān)聯(lián)蛋白1抗體Human POFUT2 ELISA Kit胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)
寬鱗大孔菌kelch樣蛋白5抗體Human PODXL2 ELISA Kit胸苷合成(TS)
異常威克漢姆酵母驅(qū)動蛋白家族成員C1抗體Human PODN ELISA Kit性激結(jié)合球蛋白(SHBG)
紫芝Kelch樣蛋白22抗體Human POFUT2 ELISA Kit性別決定區(qū)Y蛋白(SRY)
枯草芽孢桿菌電壓門控通道Kv4.1抗體Human POFUT1 ELISA Kit信號識別顆??贵w(SRP)
炭黑曲霉敏感離子通道蛋白3抗體Human POF1B ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子6(STAT6)
褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)Klotho多肽蛋白抗體Human POLD2 ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子5(STAT5)
相思根瘤菌鈣激活通道蛋白4抗體Human POGK ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子4(STAT4)
鴨疫里氏桿菌Kelch樣蛋白23抗體Human POLD1 ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子3(STAT3)
黃桿菌BTB-kelch蛋白家族10抗體Human PNMAL1 ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)
釀酒酵母BTB-kelch蛋白家族4抗體Human PNCK ELISA Kit信號傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)
傳染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)白屈菜紅堿
DH5α(含pUC19質(zhì)粒)大腸桿菌Escherichia coli DH5α( pUC19) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鹽藥根堿
ATCC19258資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)異土木香內(nèi)酯
BTK抑制劑(GDC-0853)惡臭假單胞 2-氨基-4-中性蛋白Elisa
灰綠鏈霉 間溴苯口蹄疫病非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體Elisa
枯草芽孢桿 2-環(huán)戊酮脂氧合Elisa
滑假絲酵母 4-甲基噻唑周期依賴性激2Elisa
鏈霉 2,6-二氟芐基周期E2Elisa
蘇云金芽胞桿 正壬烷凋亡蛋白激活因子1Elisa
雞傷寒沙門氏 戊基溴化鎂溶液谷氨酸脫羧Elisa
釀酒酵母 十二烷二酸葡萄糖-6-磷酸Elisa
杉葉散斑殼(都不提供) 2-乙基乙基硫尿苷二磷酸葡萄糖酸轉(zhuǎn)移Elisa
間型假絲酵母 正丁基化鎂胰蛋白Elisa
突尼斯葉桿 N-芐基化辛可寧[手性相轉(zhuǎn)移催化劑]酸性脂肪Elisa
大豆慢生根瘤 間苯結(jié)核分枝桿IgG抗體Elisa
康寧木霉 N2-異丁酰基-2′-脫氧鳥苷結(jié)核分枝桿IgM抗體Elisa
鏈霉 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N2-異丁?;?2'-脫氧鳥苷白血病病Elisa
彩色豆馬勃 甲基烯酸異辛酯泡沫病Elisa