商品介紹:
AZ191是DYRK1B高效選擇性抑制劑,IC50值17nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1594092-37-1 純度:99.03% 分子量:429.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DYRK1B抑制劑(AZ191)
英文名稱:AZ191
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
梅奇酵母大鼠補體片斷5aAnti-Phospho-Rabphilin 3A (Ser234) Antibody人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)
剛第弓形蟲小鼠前列腺性磷Anti-Phospho-S6 Kinase 1 (Thr449) Antibody人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)
黑曲霉小鼠前列腺特異性抗原Anti-Phospho-Synapsin I (Ser9) Antibody人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
大鼠補體片斷3aAnti-Phospho-Synapsin I (Ser62,67) Antibody人抗腎小球基底膜抗體(GBM)
褶皺曲霉人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3Anti-Phospho-Synaptotagmin (Ser309) Antibody人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)
產(chǎn)灰色鏈霉菌人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2Anti-Phospho-Synapsin I (Ser603) Antibody人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)
枯草芽孢桿菌大鼠卵泡抑Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser31) Antibody人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
檸條根瘤菌小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125Anti-Phospho-Synaptotagmin (Thr202) Antibody人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)
檸檬兩面神菌大鼠組織蛋白去乙?;?/span>Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) Antibody人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
粉紅聚端孢霉小鼠癌標(biāo)志物-CA153Anti-PIAS3 Antibody人抗腎小管基底膜抗體(TBM)
松杉靈芝人小扁豆結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1Anti-PHYKPL Antibody人apelin 13(AP13)
雙孢蘑菇人黑色瘤標(biāo)記物Anti-PIGH Antibody人apelin 13(AP13)
雙孢蘑菇小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199Anti-PIGY Antibody人Apelin 36(AP36)
榛針孢酵母大鼠E選擇Anti-PIK3R5 Antibody人Apelin 36(AP36)
平菇—465大鼠甲基化Anti-PIN1 Antibody人肌鈣蛋白T(Tn-T)
玫瑰單胞菌小鼠血紅氧合1Anti-PIK3C2G Antibody人肌鈣蛋白T(Tn-T)
轉(zhuǎn)導(dǎo)β1X連鎖受體蛋白1抗體葡萄酒色被孢霉人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體粉樹孢人卵巢畸胎瘤細(xì)胞
腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體炭角菌F-12K*培養(yǎng)基:
TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體牛肝菌6-4小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞
DYRK1B抑制劑(AZ191)谷棒桿 大花羊藿苷F
殼 1-氧-乙酰旋覆花內(nèi)酯
毛木耳 蘆薈甙B
卷枝毛霉 β-甘油磷酸二鈉五水物
小孢根霉少孢變種 去乙酰華蟾精
出芽短梗霉(黑酵母) 半邊旗4F
平菇 半邊旗5F
類芽胞桿 二乙?;蠡ㄐ不▋?nèi)酯
釀酒酵母 楤木皂苷A
熒光假單胞 毛鉤藤堿
費希爾曲霉 齊墩果酮酸
Pectobacterium wasabiae 當(dāng)藥苷
球毛殼 旱蓮苷D
節(jié)桿屬 常春藤皂苷元-28-O-β-D-葡萄糖酯苷
豬輪狀病(可訂購) 當(dāng)藥黃