以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
G9a抑制劑(UNC0321) | UNC0321 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
UNC0321是高親和性G9a抑制劑,Ki為63pM。UNC0321是第一個皮摩爾級G9a抑制劑,也是迄今為止G9a抑制劑中活性強(qiáng)的。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1238673-32-9 純度:98.0% 分子量:515.69 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
啤酒酵母大鼠色CAnti-Phospho TPH2 (Ser19) Antibody人水通道蛋白4(AQP-4)
栗疫菌人視網(wǎng)膜母瘤抑制蛋白Anti-Phospho-CaM Kinase II (Thr306) Antibody人水通道蛋白4(AQP-4)
盤孢菌小鼠雌激Anti-Phospho YWHAB (Ser58) Antibody人水通道蛋白3(AQP-3)
蹄形干酪菌大鼠血管緊張ⅠAnti-Phospho-Dynamin (Ser774) Antibody人水通道蛋白3(AQP-3)
產(chǎn)水鏈霉菌小鼠周期D1Anti-Phospho-EphrinB (Tyr298) Antibody人水通道蛋白2(AQP-2)
棉子糖腸球菌人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子Anti-Phospho-Fragile X Mental Retardation Protein (FMRP) (Ser499) Antibody人水通道蛋白2(AQP-2)
雅致小克銀漢霉小鼠髓磷脂堿性蛋白Anti-Phospho-GABAB R1 (Ser923) Antibody人水通道蛋白1(AQP-1)
雅致放射毛霉人成熟促進(jìn)因子Anti-Phospho-GluR1 (Ser845) Antibody人水通道蛋白1(AQP-1)
科羅多擬無枝菌大鼠黑色抗體Anti-Phospho-MEF2C (Ser222) Antibody人水通道蛋白0(AQP-0)
杰丁塞伯林德納氏酵母人去唾液糖蛋白受體Anti-Phospho-HDAC2 (Ser394) Antibody人水通道蛋白0(AQP-0)
澳型核果褐腐病菌大鼠二肽基肽ⅣAnti-Phospho-MeCP2 (Ser80) Antibody人類風(fēng)濕因子(RF)
婁地青霉小鼠轉(zhuǎn)化生長因子αAnti-Phospho-MEK5 (Ser311 Thr315) Antibody人類風(fēng)濕因子(RF)
少孢節(jié)叢孢大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4aAnti-Phospho-mGluR7 (Ser862) Antibody人抗鏈球菌溶血O/抗O(ASO)
大腸埃希菌小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白Anti-Phospho-p70 S6K (Thr398) Antibody人抗鏈球菌溶血O/抗O(ASO)
果生鏈核盤菌人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體Anti-Phospho-Olig2 (Ser10,13,14) Antibody人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)
微球菌人金屬硫蛋白Anti-Phospho-Potassium Channel, Voltage Gated, Kv3.1-Subunit (Ser503) Antibody人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)
抑癌蛋白TCHP抗體青榨槭葉斑病人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞
脫氫膽固還原14抗體李葉細(xì)菌性穿孔病小鼠抗人TNC雜交瘤細(xì)胞
甲狀腺結(jié)合球蛋白抗體*油桃樹葉細(xì)菌性穿孔病人未分化甲狀腺癌細(xì)胞
轉(zhuǎn)導(dǎo)β1X連鎖蛋白抗體櫻花葉細(xì)菌性穿孔病改良GAM肉湯 250g
G9a抑制劑(UNC0321)德爾布有孢圓酵母 Tokinolide B
阿魏側(cè)耳 前杯莧甾酮
銅綠假單胞* Hydroxy Sprengerinin C, 17-
巴斯德畢赤酵母 知母皂苷A1
人微桿 春堿
阿根廷明串珠 去氫毛鉤藤堿
溜曲霉 筋骨草甾酮C
Rhizobium cellulosilyticum 日當(dāng)藥黃
密歇根棍狀桿標(biāo)記亞種 β-甘油磷酸二鈉水合物
栗疫 商陸皂苷辛
孟氏假單胞 商陸皂苷T
枝芽胞桿屬 4'-O-甲基補(bǔ)骨脂查耳酮B
芽胞桿 (7S,7'R)-雙(3,4-亞甲二氧苯基)-rel-(8R,8'R)-二甲基四
近連續(xù)射脈革 戈米辛D
厚垣孢普可尼亞 箭藿苷A