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Caspase 8 活性檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-21 10:27:40瀏覽次數(shù):254

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20次|100次
貨號 GOY-01X9544 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 MTS?Cell?Proliferation?And?Cytotoxicity?Detection?
Caspase 8 活性檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:Anthrax 炭疽桿菌抗體二 98%
Anthrax 抗體(采用活疫苗制備)4,4'-二二苯酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品
alpha Adaptin 銜接蛋白α抗體鄰苯二二異辛酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (GC)
beta Adaptin/AP2 銜接蛋白β抗體二氫辣椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Gamma-Adaptin 銜接蛋白γ抗體二異丁酮 99%

詳細(xì)介紹

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

Caspase 8 活性檢測試劑盒

Caspase 8 Activity Assay Kit

20次|100次

1~3天

商品介紹:

本試劑盒是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中caspase 8酶活性或純化的caspase 8酶活性的試劑盒。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測時,除標(biāo)準(zhǔn)曲線外可以檢測20個樣品。

Caspase是一個在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也稱FLICE、MACH或Mch5,有時被寫作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,在細(xì)胞凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中被激活。Caspase 8被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中比較上游的一個caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過程中caspase 8被激活,形成一個由p18和p10組成的二聚體,進(jìn)一步激活下游的caspase 4,caspase 6,caspase 9和caspase 10。

本Caspase 8活性檢測試劑盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline),從而可以通過測定吸光度來檢測Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。

試劑盒中提供了caspase 8催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA,可以作為定量caspase 8酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。

試劑盒組分:

裂解液——————8ml

檢測緩沖液——————8ml

Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl

pNA(10mM)——————200μl

儲存條件:-20℃。

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)英文名稱:NRG2 ELISA Kit腺苷激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝1g

神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)英文名稱:NRG1 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7抗體包裝250mg

神經(jīng)特異性烯化(NSE)英文名稱:NSE ELISA Kit磷化鈉ATPα1多肽抗體包裝1g

神經(jīng)肽Y(NP-Y)英文名稱:NP-Y ELISA KitNa+/K+-ATPase α1 鈉ATPα1抗體包裝5g

神經(jīng)肽Y(NPY)英文名稱:NPY ELISA Kit肌動蛋白樣蛋白6B抗體包裝1g

神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)英文名稱:NF-L ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白7抗體包裝250mg

神經(jīng)絲蛋白(NF)英文名稱:NF ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

神經(jīng)生長因子前體(proNGF)英文名稱:proNGF ELISA Kitβ淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)包裝1g

神經(jīng)生長因子(NGF)英文名稱:NGF ELISA Kit載脂蛋白E抗體包裝250mg

神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)英文名稱:GFAP ELISA Kit胎蛋白AFP抗體包裝5g

少突膠質(zhì)細(xì)胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)英文名稱:OMgp-Ab ELISA Kit陰離子交換蛋白2抗體包裝100g

上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)英文名稱:ENA-78/CXCL5 ELISA Kit鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝25g

山梨脫氫(SDH)英文名稱:SDH ELISA Kit三磷腺苷家族蛋白3A抗體包裝5g

沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)英文名稱:CT IgG ELISA Kit載脂蛋白J抗體包裝10g

色上皮衍生因子(PEDF)英文名稱:PEDF ELISA Kit載脂蛋白H抗體包裝2g

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體糖化血紅蛋白(HbA1C)AT7519 HCl is a multi-CDK inhibitor for CDK1, 2, 4, 6 and 9 with IC50 of 10-210
Caspase 8 活性檢測試劑盒金黃紅色球 間氯扁桃酸白介素1α檢測試劑盒

釀酒酵母 N-甲氧羰基-L-叔亮氨酸白介素1β轉(zhuǎn)換酶檢測試劑盒

芽胞桿 磷酸二芐基酯白介素1家族成員10檢測試劑盒

釀酒酵母 3,5-二叔丁基-4-羥基苯甲白介素1可溶性受體Ⅱ檢測試劑盒

約氏乳桿 2-基-5-甲基吡啶白介素1受體相關(guān)激酶1檢測試劑盒

藤黃短小桿 2',3'-二-O-乙酰基-5'-脫氧-5-氟-D-胞啶白介素22結(jié)合蛋白檢測試劑盒

蘇云金芽胞桿櫪木亞種 4-(4-甲基哌)苯白介素23受體檢測試劑盒

南方鹽單胞 4-異基苯酸(含有數(shù)量不等的酸酐)白介素2受體檢測試劑盒

疣孢鏈霉 L-天門冬氨酸二乙酯鹽酸鹽白介素受體相關(guān)激酶檢測試劑盒

聚生殼 2,3,5-三氯吡啶白三烯B4檢測試劑盒

傳染性法氏囊病病 2-氨基-4-甲基噻唑白三烯B4受體1檢測試劑盒

青霉屬 -2-甲酸乙酯白三烯B5檢測試劑盒

水稻節(jié)桿 1-溴-4-乙基苯白三烯C4檢測試劑盒

暗黑鏈霉 2,4,5-三氟溴芐白三烯D4檢測試劑盒

挪威假絲酵母 對甲苯磺酰肼白三烯E4檢測試劑盒

 


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