商品介紹:
PAβN dihydrochloride(MC-207110dihydrochloride)是外排泵的抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):100929-99-5 別名:MC-207,110 dihydrochloride;Phe-Arg-β-naphthylamide dihydrochloride 純度:99.78% 分子量:519.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
桑根皮英文名稱: Gallic acid黑色瘤相關(guān)抗原/黑色-A抗體包裝25g
桑根H英文名稱: Gallic acid單核趨化蛋白1抗體包裝5g
桑黃英文名稱: Epothilone C巨噬克激因子抗體包裝100g
桑寄生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propyl gallate雙微體2癌基因抗體包裝500g
桑皮苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propyl gallate絲蛋白抑制劑B7抗體包裝100mg
桑皮苷F英文名稱: 2"-O-Galloylhyperin線粒體融合蛋白1抗體包裝20mg
桑皮A英文名稱: 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucoseO6基鳥嘌呤DNA基轉(zhuǎn)移抗體包裝100g
桑皮E英文名稱: Buddleoside肌肉骨骼受體酪激抗體包裝25g
桑皮H英文名稱: Rosmarinic acid結(jié)核分枝桿菌抗體包裝1g
桑色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dryocrassin ABBA膜相關(guān)環(huán)指蛋白1抗體包裝25g
桑椹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Filixic acid ABA膜相關(guān)環(huán)指蛋白2抗體包裝5g
桑辛;桑根皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Morroniside膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體包裝1g
桑葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Vitexin膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體包裝1g
桑枝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glucosyl-vitexin膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯英文名稱: vitexin-2″-o-rhamnoside膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體包裝5g
哲拉什黃桿菌Flavobacterium│degerlachei 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98,標(biāo)準(zhǔn)品抗型肝炎病抗體試劑盒大麥芽堿;Hordenine
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗酰tRNA合成,線粒體試劑盒對(duì)香豆;4-Hydroxycinnam
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品抗酰tRNA合成,質(zhì)試劑盒冬凌草;Oridonin
外排泵抑制劑(PAβN dihydrochloride)酯封端外消旋聚乳(重均分子量190-240萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量28-42萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量3-6萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量42-57萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量57-73萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量6-9.5萬(wàn))Human, Mouse
酯封端外消旋聚乳(重均分子量73-109萬(wàn))Human
酯封端外消旋聚乳(重均分子量9.5-16萬(wàn))Human
酯封端右旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬(wàn))Human