商品介紹:
Tolimidone是一個(gè)有效且有選擇性的Lyn kinase變構(gòu)激活劑,其EC50值為63nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):41964-07-2 別名:MLR-1023 純度:99.87% 分子式:C??H??N?O? 分子量:202.21 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):Lyn kinase變構(gòu)激活劑(Tolimidone)
英文名稱(chēng):Tolimidone
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
黃曲霉*絲/蘇蛋白激NEK8抗體Human LTB4R(Leukotriene B4 receptor 1) ELISA Kit人抗BP180抗體(anti-BP180-Ab)ELISA Kit
*灰葡萄孢核孔蛋白Nup37抗體Human AGRP(Agouti-related protein) ELISA Kit人抗BB抗體(BB-Ab)ELISA Kit
漫游孢囊菌屬核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體Human GHSR(Growth hormone secretagogue receptor type 1) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌 B核苷結(jié)合蛋白1抗體Human PPY(Pancreatic prohormone) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA Kit
稻麥穗孢霉核苷結(jié)合蛋白2抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA Kit
無(wú)花果曲霉乙酰基轉(zhuǎn)移10抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA Kit
芹側(cè)耳(杏鮑菇)絲/蘇蛋白激Nek7抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit卷曲蛋白8(FZD8)ELISA Kit
傳染性法氏囊病病神經(jīng)正五聚體1抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit聚集蛋白(Agrin)ELISA Kit
金太陽(yáng)杏葉細(xì)菌性穿孔病煙酰核苷轉(zhuǎn)氫抗體Human SERPINA3(Alpha-1-antichymotrypsin) ELISA Kit巨噬移動(dòng)因子(MIF)ELISA Kit
青灰紅菇利鈉肽受體B抗體Human AGT(Angiotensinogen) ELISA Kit巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA Kit
金黃殼囊孢菌利鈉肽受體C抗體Human CTNNβ1(Catenin beta-1) ELISA Kit巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA Kit
大腸埃希氏菌磷化谷受體2B抗體Human APOE(Apolipoprotein E) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA Kit
木糖葡萄球菌磷化谷受體2B抗體Human HIF1A(Hypoxia-inducible factor 1-alpha) ELISA Kit巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA Kit
木霉NADPH氧化2抗體Human MAP2K5(Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5) ELISA Kit巨噬炎性蛋白2(MIP-2)ELISA Kit
構(gòu)巢曲霉NADPH氧化活化蛋白1抗體Human IAPP(Islet amyloid polypeptide) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA Kit
孢小克銀漢霉輪生變種磷化核因子抗體Human NOS3/eNOS(Nitric oxide synthase, endothelial) ELISA Kit巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA Kit
綠色木霉=木木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格:BR,RZ>2.5,活性>250U/mg槲皮苷
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥500IU/mg,BR,牛源提取槲皮
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥3TIU/mg,進(jìn)分,來(lái)源: 牛肺或牛胰花旗松;二氫槲皮
Lyn kinase變構(gòu)激活劑(Tolimidone)GAP43 神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43鋅粒 99.99% metals basis
phospho-GAP43(Ser41) 化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗體超純鋅粒 棒狀,99.9999% metals basis
GAPDH 3-甘油脫氫(兔來(lái)源免疫組化用抗體)鋅 99.999% metals basis
GAPDH 3-甘油脫氫(兔來(lái)源免疫組化用抗體)鋅粒 SP
GAPDH 3-甘油脫氫(兔來(lái)源免疫組化用抗體)雙環(huán)己酮草酰二腙 AR
GAI3 抑制型G蛋白α3抗體二酰一肟 AR
CXCR3/CD183 表面趨化因子受體3抗體間紅 Indicator
CXCR3/CD183 表面趨化因子受體3抗體米氏酮 98%