商品介紹:
M2離子通道阻斷劑能抑制和阻斷M2離子通道,能抗病毒。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1190215-03-2 別名:L-Histidine, N-(tricyclo[3.3.1.13,7]dec-1-ylmethyl)-, methyl ester 純度:95.0% 分子量:317.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:M2離子通道抑制劑(M2 ion channel blocker)
英文名稱:M2 ion channel blocker
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
阿曲汀/阿英文名稱: 5-Isopropyl-2-methylphenol同源盒蛋白HOXB13抗體包裝5g
阿瑞吡坦;阿瑞匹坦英文名稱: METHYL HEPTADECANOATE磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體包裝1g
阿替洛爾英文名稱: 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester磷化P63腫瘤抑制基因抗體包裝25g
阿托伐醌,阿托喹英文名稱: 6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN磷化p21激活激4抗體包裝5g
阿西美辛英文名稱: PIEFELTARRAENIN A磷化P73腫瘤抑制基因抗體包裝100g
埃索美拉唑鎂(三)英文名稱: Tomatidine磷化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體包裝25g
艾地醌英文名稱: (-)-CAMPHORp53正向凋亡調(diào)控因子抗體包裝5g
艾普拉唑/奧普拉唑英文名稱: 3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID磷脂C1樣蛋白抗體包裝25g
安替比林英文名稱: 3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白包裝1g
蝶啶英文名稱: OrangeΙΙ重組蛋白G抗體包裝250mg
芬鈉英文名稱: AURAMINE O 磷脂酰肌激催化亞單位A抗體包裝1g
基比林英文名稱: Carmine蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體包裝250mg
己烯英文名稱: Acid Red 51足特異蛋白抗體包裝25g
環(huán)英文名稱: Acid Red 73腫瘤抑制基因抗體(野生型P53)包裝100g
奧達(dá)唑英文名稱: Lauric acid配對(duì)盒基因7抗體包裝25g
地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品肌強(qiáng)直蛋白蛋白激試劑盒白果新;Ginkgolic Acid
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>1500U/mg,USP,BR肌聯(lián)蛋白試劑盒百秋李;Patchouli alcoh
亞德食烷菌Alcanivorax│jadensis 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定肌腱蛋白R(shí)試劑盒白鮮堿;Dictamnine
M2離子通道抑制劑(M2 ion channel blocker)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1結(jié)合蛋白1抗體硫小檗(標(biāo)準(zhǔn)品) HES
狂躁因同源蛋白MFNG抗體柳穿魚黃(標(biāo)準(zhǔn)品) DIPSO Monosodium
E3泛蛋白連接MIB1抗體龍膽(堅(jiān)龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品) DIPSO
主導(dǎo)控制樣蛋白1抗體龍膽(龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品) DMPS
主導(dǎo)控制樣蛋白2抗體龍膽花(標(biāo)準(zhǔn)品) CHPS-Na
絲裂原活化蛋白激6抗體龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium 2-bromoethanesulphonate
磷化絲/蘇蛋白激MST4,MST3,STK25抗體龍膽;2,5-二羥(標(biāo)準(zhǔn)品) BICINE
表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白Megf10抗體龍脷葉(標(biāo)準(zhǔn)品) BES Sodium Salt
MPP4蛋白抗體龍腦(標(biāo)準(zhǔn)品) BES free acid