以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PlK4抑制劑(Centrinone) | Centrinone | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
英文名稱:Centrinone 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg Centrinone是選擇性的可逆的PlK4抑制劑,Ki值為0.16nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1798871-30-3 純度:98.01% 分子量:633.65 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
尖孢鐮孢FBXL21蛋白抗體Human ZWILCH ELISA Kit貓白介4(IL-4)免疫試劑盒
黑木耳F-box蛋白家族FBXO7抗體Human BCKDHA ELISA Kit貓白介2(IL-2)免疫試劑盒
禾生殼二胞F-box蛋白家族FBXO11抗體Human BDH2 (3-hydroxybutyrate dehydrogenase type 2) ELISA KIT貓白介12(IL-12)免疫試劑盒
葡枝根霉F-box蛋白家族FBXO25抗體Human BCKDK ([3-methyl-2-oxobutanoate dehydrogenase [lipoamide]] kinase, mitochondrial) ELISA KIT貓α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
托姆青霉F-box蛋白家族FBXO18抗體Human HMGCLL1 (3-hydroxymethyl-3-methylglutaryl-CoA lyase, cytoplasmic) ELISA KIT貓p27核心抗原(P27)免疫試劑盒
靈芝(赤芝,紅靈芝)FRG2B蛋白抗體Human HIBADH (3-hydroxyisobutyrate dehydrogenase, mitochondrial) ELISA KIT貓5羥色/血清/血清(5HT/ST)免疫試劑盒
茶莖點(diǎn)霉FAM71A蛋白抗體Human ZSCAN5A ELISA Kit馬
孟氏假單胞菌FAM83F蛋白抗體Human ZNF763 ELISA Kit馬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFB2)免疫試劑盒
泡盛曲霉FBXL17蛋白抗體Human ZNF750 ELISA Kit馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
葡萄園有孢漢遜酵母FCHSD1蛋白抗體Human MTRR (Methionine synthase reductase) ELISA KIT馬孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
藍(lán)微褐鏈霉菌FBXL5蛋白抗體Human ACTL9 (Actin-like protein 9) ELISA KIT馬2,3-雙加氧1(IDO1)免疫試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌FBXL12蛋白抗體Human PGLS (6-phosphogluconolactonase) ELISA KIT馬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫試劑盒
澤普林假絲酵母FBXL3蛋白抗體Human PFKFB1 (6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase 1) ELISA KIT馬血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)免疫試劑盒
施氏假單胞菌F-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體Human DHCR7 (7-dehydrocholesterol reductase) ELISA KIT馬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
溶桿菌FGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體Human AAK1(AP2-associated protein kinase 1) ELISA Kit馬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒
貝萊斯芽胞桿菌成纖維生長因子受體底物2抗體Human ALPP(Alkaline phosphatase, placental type) ELISA Kit馬血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)β-
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%L-
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)γ-基丁
PlK4抑制劑(Centrinone)皺膜假絲酵母 5--3-酸支原體Elisa
泰安羧酸利用桿 變藍(lán)白痢雞傷寒抗體Elisa
長雙歧桿 甘氨酰甘氨酸芐酯對(duì)甲苯磺酸鹽副嗜血桿Elisa
玫瑰色熱微 甘氨酸芐酯鹽酸鹽P53蛋白Elisa
球毛殼 4-氟苯氧基乙酰肼H9型病Elisa
Roseivivax isoporae 4-(三氟甲氧基)芐傷寒沙門氏抗體Elisa
蠟蚧 3,5-二硝基-L-酪氨酸副傷寒沙門氏抗體Elisa
乳酸乳球乳亞種 1-乙炔基環(huán)戊禽呼腸孤病Elisa
貝倫格葡萄座腔 4--3-(三氟甲基)苯甲禽痘病Elisa
三葉草根瘤 Tyr-Phe禽腦脊髓炎病Elisa
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿 蘇丹藍(lán)II禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病Elisa
破傷風(fēng)梭 對(duì)硝基肉桂禽白血病病Elisa
纖細(xì)芽孢桿 2,2-二甲基琥珀酸酐傳染性法氏囊病Elisa
桃色歐文氏 4-溴苯鄰二酚傳染性喉氣管炎病Elisa
大腸埃希 (S)-(+)-5-羥甲基-2-吡咯烷酮禽呼腸孤病抗體Elisa