Bcl-2抑制劑(GDC-0199)公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-MEK1 (Thr286) 化絲裂原活化蛋白激激1抗體壬 98%
Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體1-辛 99%
Phospho-MEK1/2 (Ser221) 化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體1-辛 97%
phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/1

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

甘露聚糖結(jié)合凝集關(guān)聯(lián)絲蛋白1(MASP1)英文名稱：MASP1 ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝1g

甘脫氫(GLDC)英文名稱：GLDC ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝25g

鈣網(wǎng)蛋白(CRT)英文名稱：CRT ELISA Kit磷化CREB-1抗體包裝5g

鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPB2(ATP2B2)英文名稱：ATP2B2 ELISA Kit磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g

鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATPA2(ATP2A2)英文名稱：ATP2A2 ELISA Kit磷化N-鈣粘附分子抗體包裝25g

鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)英文名稱：iPLA2 ELISA Kit磷化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體包裝5g

鈣蛋白抑制蛋白(CAST)英文名稱：CAST ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100g

鈣蛋白10(CAPN10)英文名稱：CAPN10 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝25g

鈣蛋白1(CAPN1)英文名稱：CAPN1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框75抗體包裝25ml

復(fù)制啟動(dòng)因子1(REPIN1)英文名稱：REPIN1 ELISA KitCD4抗體包裝5ml

輔肌動(dòng)蛋白α2(ACTN2)英文名稱：ACTN2 ELISA Kit血小板糖蛋白GPIb抗體包裝1g

封閉蛋白3(CLDN3)英文名稱：CLDN3 ELISA Kit蛋白精N基4抗體包裝1g

封閉蛋白2(CLDN2)英文名稱：CLDN2 ELISA Kit磷化蛋白精N基4抗體包裝25g

分泌性白細(xì)胞蛋白抑制因子(SLPI)英文名稱：SLPI ELISA Kit磷化周期依賴性激6抗體包裝5g

分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)英文名稱：SFRP5 ELISA Kit磷化原癌基因CBL2抗體包裝100mg

細(xì)鏈格孢Alternaria│tenuis Nees 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白A4試劑盒遠(yuǎn)華蟾蜍精;ocinobufagi

小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質(zhì)量規(guī)格：含量>99.0%，無載脂蛋白A2試劑盒氧化槐定堿;Oxysophoridine

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品載脂蛋白A1試劑盒薏苡;Coixol
Bcl-2抑制劑(GDC-0199)畢赤酵母 (R)-3-(3-甲基丁酰)-4-芐基-2-惡唑烷酮CCDC49抗體Elisa

解淀粉芽孢桿 2-羥甲基噻唑天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

冠突曲霉 5-噻唑甲酸甲酯葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4Elisa

廈門交替紅色桿 噻唑-4-羧酸乙酯型肝炎病IgM抗體Elisa

喜濕小脆柄菇 5-溴-2-(溴甲基)吡啶早孕因子蛋白Elisa

粘紅酵母 2-基噻唑巨噬炎性蛋白Elisa

根瘤 2,2’-硫代雙(對(duì)叔辛基苯酚)鎳-正丁絡(luò)合物布魯氏IgG抗體Elisa

美澳型核果褐腐病 五羰基溴化錳(I)布魯氏IgM抗體Elisa

節(jié)桿 N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟磺酰亞)α-N-乙?；肴樘擒誆lisa

魯氏毛霉 Fmoc-L-天冬氨酸 4-甲酯維生D結(jié)合蛋白Elisa

空泡單胞 5-氧基-4-甲基-1,2,4-三唑啉酮四旋蛋白1Elisa

狹窄革 2,6-二氟-3-甲氧基苯小亞基鈣蛋白2Elisa

梨生殼囊孢 4-氯-3,5-二氟苯小亞基鈣蛋白1Elisa

米曲霉 3-氯肉桂酸半胱氨酸蛋白抑制劑4Elisa

潘諾尼亞鎖霉 4-(1-羥基-1-甲基乙基)-2-基-1H-咪唑-5-羧酸乙酯凝血因子XIII A1Elisa