DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)公司*的產(chǎn)品：Rabbit Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)L-蘇氨酯鹽鹽 98%
Rabbit MK IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗猴IgG(10nm/15nm)N-酰-L-色氨酯 98%
Rabbit rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG(10nm/15nm)D-酪氨酯鹽鹽 99%
Rabbi

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)

英文名稱：DNA Ligase IV Inhibitor

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

金黃殼囊孢4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit人結(jié)核菌桿(TB)抗體(IgA)免疫試劑盒

海角副球菌分支GBE1抗體Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒

擬莖點(diǎn)霉磷化絲切蛋白抗體Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)免疫試劑盒

平田頭菇補(bǔ)體成分5受體1抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit人結(jié)蛋白(DES)抗體免疫試劑盒

廣島鏈霉菌分裂周期2樣蛋白激6抗體Human HSD11B1(Corticosteroid 11-beta-dehydrogenase isozyme 1) ELISA Kit人結(jié)蛋白(Des)免疫試劑盒

硬結(jié)節(jié)桿菌補(bǔ)體C3IP1抗體Human SEMA3A(Semaphorin-3A) ELISA Kit人角化生長(zhǎng)因子(KGF)免疫試劑盒

果生鏈核盤(pán)菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human HRG(Histidine-rich glycoprotein) ELISA Kit人角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒

異常漢遜酵母變種周期依賴性激11抗體Human SMOX(Spermine oxidase) ELISA Kit人膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)免疫試劑盒

芬娜冬菇周期依賴性激10Human SSTR2(Somatostatin receptor type 2) ELISA Kit人膠質(zhì)系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌枯草亞種8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體Human CASP7(Caspase-7) ELISA Kit人膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒

特異青霉（產(chǎn)黃青霉）磷化分裂周期蛋白25B抗體Human NEFH(Neurofilament heavy polypeptide) ELISA Kit人降脂(Adipsin)免疫試劑盒

血痕韌革菌磷化分裂周期蛋白25B抗體Human AMOT(Angiomotin) ELISA Kit人降鈣原(PCT)免疫試劑盒

鹽古桿菌磷化半胱蛋白蛋白6抗體Human APLN(Apelin) ELISA Kit人降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒

高盧蜜環(huán)菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框172抗體Human GAS1(Growth arrest-specific protein 1) ELISA Kit人降鈣(CT)免疫試劑盒

球孢白僵菌磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑Human MASP2(Mannan-binding lectin serine protease 2) ELISA Kit人堿性胎兒蛋白(BFP)免疫試劑盒

發(fā)酵成對(duì)桿菌表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體Human TFR2(Transferrin receptor protein 2) ELISA Kit人堿性磷(ALP)免疫試劑盒

冷海黃桿菌Flavobacterium│frigidimaris 質(zhì)量規(guī)格：AR白皮杉;

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：AR紫草呋喃A

外來(lái)毛霉Mucor│adventitius 質(zhì)量規(guī)格：IND光萼野百合堿;烏沙拉明 光萼豬屎豆堿;
DNA連接酶IV抑制劑(SCR7)樹(shù)舌 1,3-二-4,6-二c-fosElisa

冷彎曲 2,4-二羰基庚酸乙酯S100鈣結(jié)合蛋白A8復(fù)合物Elisa

釀酒酵母 3-溴-4-羥基吡啶磷脂酰Elisa

擲孢酵母 4-溴-2-羥基吡啶酸性磷酸Elisa

玫煙色擬青霉（10個(gè)工作日） 2-氟-4-鎖鏈Elisa

黃曲霉 九氟丁基磺酸酐酮體Elisa

赤霉屬 4-(三氟甲基)苯肼隱熱蛋白Elisa

葫蘆小叢殼 釷試劑羥脯氨酸Elisa

釀酒酵母 3-氨基烷磺酸Ⅱ型前膠原羧基端肽Elisa

枯草芽孢桿 1-[3,5-雙(三氟甲基)苯基]乙12S-羥化二十碳四烯酸Elisa

長(zhǎng)白山傘枝霉 2-溴喹喔啉結(jié)核桿Elisa

巨大芽孢桿 3,5-二氨基三氟甲苯γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨Elisa

放射形根瘤 三乙基氧四氟酸抗內(nèi)膜抗體Elisa

阿魏側(cè)耳-天山2號(hào) 三乙基氧四氟酸前列腺酸性磷酸Elisa

淡紫擬青霉 異魯米諾可溶性生激表達(dá)基因2蛋白Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)