MEK1抑制劑(GDC-0623)公司正在出售的產(chǎn)品：H1N1/Gold 膠體金標(biāo)記抗流感病A抗體IgG四-O-特戊酰-β-D-半乳糖 99%
A/H2N2 /FITC 熒光標(biāo)記兔抗2（H2N2）亞型流感抗體（2型）IgG酰溴-α-D-葡萄糖 包含 1% CaCO3 穩(wěn)定劑, 98%
H2AX/FITC 熒光標(biāo)記組蛋白H2AX抗體IgG鄰氧苯 CP,97%
Haase/FITC 熒光標(biāo)記透

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

橙黃紅酵母大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白Anti-Phospho Ras-GRF1 (Ser916) Antibody人FMS樣酪激3配體(Flt-3L)

米根霉小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成Anti-Phospho RPS6 (Ser244) Antibody人FMS樣酪激3配體(Flt-3L)

雅致放射毛霉大鼠血管緊張?jiān)?/span>Anti-Phospho RGS16 (Tyr168) Antibody人血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)

哈茨木霉小鼠組Anti-Phospho RRN3 (Ser649) Antibody人血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)

枯草芽孢桿菌枯草亞種人c-myc癌基因產(chǎn)物Anti-Phospho SH3BP2 (S427) Antibody人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)

熱帶假絲酵母人Smad1Anti-Phospho SLC12A5 (KCC2) (Ser940) Antibody人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)

大腸埃希氏菌大鼠熱休克蛋白60Anti-Phospho SHB (Tyr246) Antibody人Podocin

枯草芽孢桿菌小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2Anti-Phospho SLC6A3 (DAT) (Thr53) Antibody人Podocin

肺炎克雷伯氏菌肺炎亞種小鼠熱休克蛋白90Anti-Phospho SLC6A4 (Thr276) Antibody人蛋白(nephrin)

肉糜  馬源性成分（定性）人Smad7Anti-Phospho SNCA (Ser129) Antibody人蛋白(nephrin)

中國漢納酵母乳變種大鼠二Anti-Phospho SNAP25 (Ser187) Antibody人α1微球蛋白(α1-MG)

枯草芽孢桿菌大鼠超氧化物歧化Anti-Phospho SMC1A (S966) Antibody人α1微球蛋白(α1-MG)

特異腐質(zhì)霉人腫瘤相關(guān)抗原Anti-Phospho SMAD3 (S423/S425) Antibody人尿微量白蛋白(ALB)

大腸埃希氏菌小鼠熱休克蛋白70Anti-Phospho SQSTM1 (Ser28) Antibody人尿微量白蛋白(ALB)

曲霉小鼠脂聯(lián)Anti-Phospho STXBP1 (Ser241) Antibody人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)

Thielavia 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96Anti-Phospho TAOK2 (Ser181) Antibody人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)

前列腺癌抑癌蛋白3抗體山茶刺盤孢人惡性霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞

抑癌基因5抗體刺盤孢屬人食管腺癌細(xì)胞

腦腫瘤抑癌蛋白1抗體殼囊孢屬小鼠正常骨髓細(xì)胞

腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13腫瘤抑制基因桑樹枝枯病人盲腸腺癌細(xì)胞（未分化）
MEK1抑制劑(GDC-0623)有孢漢遜酵母屬 5-氟乳清酸

楊尾孢 油酸

土曲霉 亞油酸

長孢糖絲 7-β-羥基膽固

短密青霉 27-羥基膽固

漢遜德巴酵母 二甲基姜黃

少根根霉原變種 柚皮查爾酮

頂孢頭孢霉 四甲基姜黃

根瘤 去氫延胡索甲硝酸鹽

南擬酵母 亞油酸

暗孢節(jié)菱孢 肌

腸沙門氏腸亞種雞血清型 二氫兩面針堿

竹蓀屬 四氫表小檗堿

粘質(zhì)沙雷氏 環(huán)氧前胡

不動桿 8-羥基佛手苷內(nèi)酯