mAChR激動(dòng)劑（Pilocarpine Hydrochloride）公司*的產(chǎn)品：Anti-PLCG 2/PLC gamma 2/FITC 熒光素標(biāo)記磷酯酶Cγ2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-NFAM1/CNAIP/FITC 熒光素標(biāo)記NFAM1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus an

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：mAChR激動(dòng)劑（Pilocarpine Hydrochloride）

英文名稱(chēng)：Pilocarpine Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|100mg|500mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

豇豆慢生根瘤菌高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human FBLN2(Fibulin-2) ELISA Kit人抗菌肽(Att)ELISA Kit

檸條根瘤菌核因子/k基因結(jié)合核因子抗體Human FGG(Fibrinogen gamma chain) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human VIP(VIP peptides) ELISA Kit人抗性磷(TRACP)ELISA Kit

蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Human TNFRSF10A(Tumor necrosis factor receptor superfamily member 10A) ELISA Kit人抗抗體(AsAb)ELISA Kit

芽孢桿菌生長(zhǎng)抑制蛋白NDN抗體Human FGG(Fibrinogen gamma chain) ELISA Kit人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA Kit

鏈霉菌神經(jīng)生長(zhǎng)因子β抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) ELISA Kit人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA Kit

廣食黃桿菌鼻咽癌相關(guān)基因6抗體Human VIP(VIP peptides) ELISA Kit人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA Kit

糖化酵母鈉氫通道蛋白抗體Human CTGF(Connective tissue growth factor) ELISA Kit人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA Kit

青貯窖芽孢桿菌鈉氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human βEP(Beta-endorphin) ELISA Kit人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌神經(jīng)元特異性烯化/γ 烯化抗體Human LRP2(Low-density lipoprotein receptor-related protein 2) ELISA Kit人抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA Kit

釀酒酵母神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體Human BMPR1A(Bone morphogenetic protein receptor type-1A) ELISA Kit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌核受體相關(guān)因子-1抗體Human CD86(T-lymphocyte activation antigen CD86) ELISA Kit人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA Kit

釀酒酵母核因子2相關(guān)因子2抗體Human CXCR1(C-X-C chemokine receptor type 1) ELISA Kit人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA Kit

頂青霉神經(jīng)纖毛蛋白1抗體Human C3(Complement C3) ELISA Kit人抗黃體生成抗體(Anti LH Ab)ELISA Kit

扣囊復(fù)膜孢酵母神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5抗體Human LPA(Lipoprotein a) ELISA Kit人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)ELISA Kit

黑紫紅菇巢蛋白NID2抗體Human CP(Ceruloplasmin) ELISA Kit人抗環(huán)瓜肽抗體(CCP)ELISA Kit

桔綠木霉Trichoderma citrinoviride Bissett 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR咖啡

平田頭菇Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod 質(zhì)量規(guī)格：BR，>7U/MG, powder氧化苦參堿

白馬勃Calvatia│candida (Rostk.) Hollós 質(zhì)量規(guī)格：活力≥30000u/g苦參堿
mAChR激動(dòng)劑（Pilocarpine Hydrochloride）FPRL1  脂氧受體1抗體鉍 99.999%,1-6mm

Measles virus fusion protein  麻疹病融合蛋白抗體鉍 99.9999%,1-6mm

TBX2/T-box2   血栓B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌因)鉍粉 99.99% metals basis，200目

FSH receptor  促卵泡激受體抗體硫化鎘 99.999%

Follistatin  卵泡抑抗體鎘 99.999%,granular

FSP/Spastin  纖維母表面蛋白抗體碲化鎘 99.999%，5N

FSH  促卵泡激抗體碲化鎘 99.9999%，6N

FHIT  脆性組氨三聯(lián)體抗體銦 99.999% 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)