KRAS-PDEδ抑制劑(Deltarasin)公司正在出售的產(chǎn)品：AU1 tag/FITC 熒光標(biāo)記抗AU1 tag標(biāo)簽抗體IgG CP,95.0%（劇品）
Aurora A /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、牛、兔、馬、豬有絲分裂激A抗體IgG鉻鈉,四水 AR,99.0%
Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化有絲分裂激A抗體I

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

大腸埃希氏菌FOS樣抗原2Anti-CLDN19 Antibody人可溶性粘附分子(Sam)

釀酒酵母叉頭蛋白F1抗原Anti-CLDN3 Antibody人可溶性粘附分子(Sam)

香菇插頭蛋白J1抗原Anti-CLDN5 Antibody人巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

大腸埃希氏菌FoxP1（T轉(zhuǎn)錄因子）抗原Anti-CLDN3 Antibody人巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)

英諾克李斯特氏菌插頭蛋白M1抗原Anti-CLDN6 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)

相思根瘤菌麻疹病抗原（麻疹病融合蛋白）Anti-CLDN7 Antibody人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)

澳型核果褐腐病菌促卵泡激受體抗原Anti-CLEC11A Antibody人胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)

凱斯特鞘單胞菌促卵泡激抗原Anti-CLDN8 Antibody人胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)

山藥枯萎病γ1基丁A型受體α1抗原Anti-CLEC3B Antibody人穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)

HIV假病 18A-41g-基丁B1受體(多肽)Anti-CLIC3 Antibody人穿孔/成孔蛋白(PF/PFP)

短波單胞菌屬γ1基丁A型受體B2抗原Anti-CLEC4M Antibody人多效生長(zhǎng)因子(PTN)

明尼蘇達(dá)被毛孢谷脫羧-67抗原Anti-CLEC4A Antibody人多效生長(zhǎng)因子(PTN)

澳型核果褐腐病菌生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因153抗原Anti-CLIP2 Antibody人可溶性CD28(sCD28)

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種磷化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗原Anti-CLIC6 Antibody人可溶性CD28(sCD28)

纖細(xì)正青霉3-磷甘油脫氫(人)抗原Anti-CLIP3 Antibody人淋巴因子

紡織品 特種動(dòng)物纖維含量 （綿羊毛與山羊絨）表面趨化因子受體3抗原Anti-CLK2 Antibody人淋巴因子

腺苷單磷活化蛋白激γ2抗體魯氏接合酵母人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體莫格球擬酵母小鼠T淋巴瘤細(xì)胞（雞OVA基因修飾）

磷酯Cβ1抗體紅平紅球菌人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞

PRPF4蛋白抗體放射性根瘤菌小鼠前胃癌細(xì)胞
KRAS-PDEδ抑制劑(Deltarasin)草螺 2,3,23-三羥基-12-齊墩果烯-28-酸

金頂側(cè)耳 2''-Acetylastragalin

金針菇 24,25-Dihydroxycycloartan-3-one

大腸埃希氏 22-脫氫赤桐甾葡糖苷

豬瘟活疫苗（兔源）國(guó)家參考品  2',4'-Dihydroxy-3',6'-dimethoxyc

蟬花 2,3',4,6-Tetrahydroxybenzophenon

柞蠶鏈球 2,3,2",3"-Tetrahydroochnaflavone

硝酸鹽還原 2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16-貝殼杉烯二

棒曲霉 2-O-beta-D-吡喃阿洛糖甙-2,16,19-貝殼杉烯三

藤黃孢鏈霉 1-O-Deacetylkhayanolide E

地衣芽孢桿 1-O-Deacetyl-2α-hydroxykhayanoli

Pseudomonas 1-Hydroxy-2-oxopomolic acid

硫磺 19-羥基漿果赤霉 III

大腸埃希 16-Epinormacusine B

枯草芽孢桿 15-甲氧基松柏酸