商品介紹:
英文名稱:PJ34 hydrochloride 產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg PJ34hydrochloride是一種有效的特異的PARPl/2抑制劑,IC50值分別為110nM和86nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:344458-15-7 純度:98.44% 分子量:331.8 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PARPl和PARP2抑制劑 | PJ34 hydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
盤長孢狀盤孢磷化HER2受體抗體Human SGPP1(Sphingosine-1-phosphate phosphatase 1) ELISA Kit大鼠過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
凍干粉 腸道出血性大腸埃希氏菌(EHEC)(陽性)組蛋白去乙?;?抗體Human Synaptotagmin-11 ELISA Kit大鼠過敏/補體片斷4a(C4a)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種磷化組蛋白去乙?;?/span>6抗體Human SYNGAP1 ELISA Kit大鼠果糖(FRA)免疫試劑盒
假單胞菌組蛋白去乙?;?/span>7抗體Human SUPT6H ELISA Kit大鼠胱抑SN(CST1)免疫試劑盒
黃硬皮馬勃磷化組蛋白去乙酰化7抗體Human SUPT7L ELISA Kit大鼠胱抑SA(CST2)免疫試劑盒
粉紅單端孢霉組蛋白去乙?;?/span>8抗體Human SUPV3L1 ELISA Kit大鼠胱抑S(CST4)免疫試劑盒
光帽磷傘磷化HER4抗體Human SURF1 ELISA Kit大鼠胱抑D(CST5)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌組tRNA連接抗體Human SURF2 ELISA Kit大鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒
Polyangium fumosum 雞新城疫血凝-神經(jīng)抗體Human FKBP8(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP8) ELISA Kit大鼠胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒
冷解糖芽孢桿菌熱休克蛋白105抗體Human SUV39H1 ELISA Kit大鼠胱天蛋白7(CASP7)免疫試劑盒
普氏菌肝核因子1α抗體Human SUV39H2 ELISA Kit大鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌缺氧誘導(dǎo)因子1β /HIF-1β抗體Human SUZ12 ELISA Kit大鼠胱硫-γ-裂解(CSE)免疫試劑盒
釀酒酵母熱休克轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human STT3A ELISA Kit大鼠胱硫β-合(CBS)免疫試劑盒
少根根霉HA tag標(biāo)簽抗體Human STXBP2 ELISA Kit大鼠瓜免疫試劑盒
杰丁畢赤酵母缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體Human STT3B ELISA Kit大鼠固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1C(SREBP-1C)免疫試劑盒
球孢白僵菌人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) ELISA Kit大鼠固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1A(SREBP-1A)免疫試劑盒
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,≥99.5% (GC)銀杏內(nèi)酯J
亞細亞菌屬Asaia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Standard for GC,>99%(GC)灰氈毛忍冬皂苷乙
色鹽桿菌Chromohalobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥99.5%(GC)人參皂苷Ro
PARPl和PARP2抑制劑釀酒酵母 (+/-)-1-苯甲氧基羰基-4-Boc-哌-2-羧酸鐵蛋白Elisa
乳酸乳球乳亞種 三氟甲磺酸镥脂蛋白脂Elisa
塔賓曲霉 1--6,6-二甲基-2-庚烯-4-炔, 順式+反式腫瘤壞死因子αElisa
嗜冷希瓦氏 2-甲氧基-5-溴-6-腦脊髓炎Elisa
土地桿 N-FMOC-1-氨基環(huán)烷羧酸乙型肝炎病表面抗原Elisa
耶爾森氏屬 環(huán)基酸頻哪酯流感病Elisa
灰腐質(zhì)霉 (R)-(-)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚二(三氟甲磺酸酯)睪酮Elisa
枯草芽孢桿 碳氮化鈦雌Elisa
砂深海桿 鋁鎳合金催化劑腎上腺Elisa
蠟狀芽孢桿 鎳鋁合金去甲腎上腺Elisa
釀酒酵母 (R)-2-哌羧酸 孕酮Elisa
拱狀靈芝 2-氨基-3-溴-6-血清促性腺Elisa
泡盛曲霉變種 雷氏曼著色劑抗HCG抗體Elisa
彎曲芽孢桿 2,3,5-三氟苯甲雄性Elisa
彩色豆馬勃 4-乙氧基-2,3-二氟,JRD生長Elisa