商品介紹:
BSI-201(Iniparib;NSC-746045)是PARP1抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:160003-66-7 別名:Iniparib;NSC-746045;IND-71677 純度:99.46% 分子量:292.03 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PARP1抑制劑(BSI-201)
英文名稱:BSI-201
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
谷棒桿菌人轉(zhuǎn)移因子Anti-Phospho PRAG1 (Tyr413) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)
熱灰鏈霉菌大鼠肌鈣蛋白ⅠAnti-Phospho PRKD1 (Ser738+Ser742) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)
果生鏈核盤菌小鼠銅藍(lán)蛋白Anti-Phospho PPP1R1B (Thr34) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)
釀酒酵母大鼠血清淀粉樣蛋白AAnti-Phospho PRKN (Ser101) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)
五原假黃單胞菌人結(jié)腸癌抗原Anti-Phospho PTK6 (Tyr447) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)
運(yùn)動替斯崔納菌小鼠p53Anti-Phospho PRKCQ (Ser676) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)
黃藍(lán)狀菌小鼠環(huán)磷鳥苷Anti-Phospho PRKN (Ser378) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
多食鞘桿菌大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-Phospho PRKD2 (Ser876) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)
釀酒酵母人H-rasAnti-Phospho PTPN3 (PTPH1)(Ser459) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)
鞘單胞菌屬大鼠α1性糖蛋白Anti-Phospho RAD17 (Ser646) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)
白長鏈霉菌人c-sisAnti-Phospho RAF1 (Ser301) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)
光柄滑銹傘小鼠一氧化氮合成Anti-Phospho RAF1 (Ser642) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)
植物乳桿菌小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成Anti-Phospho RAPGEF1 (Tyr504) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)
Paraburkholderia sp.大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3Anti-Phospho RB1 (Ser780) Antibody人基質(zhì)金屬蛋白1(MMP-1)
葡萄座腔菌人c-junAnti-Phospho RHO (Ser334) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)
凝結(jié)芽胞桿菌人c-fosAnti-Phospho RPA2 (S33) Antibody人FMS樣酪激3(Flt3)
20號染色體開放閱讀框11抗體殼蕉孢屬人腎癌Wilms細(xì)胞
跨膜蛋白TMED4抗體粉紫香蘑人永生化表皮細(xì)胞
末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移抗體綠菇人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
肺癌抑癌蛋白1抗體橘紅多孔菌人皮膚基底細(xì)胞癌細(xì)胞
PARP1抑制劑(BSI-201)阿姆斯特丹曲霉 N-乙二-N,N′,N′-三乙酸三鈉
蠟狀芽孢桿 N-乙二-N,N′,N′-三乙酸
蠟狀芽孢桿 乙二四乙酸二鈉鎂鹽
肉桂紫青霉 乙二四乙酸二鈉鎂鹽四水物
枯草芽孢桿 乙二四乙酸鐵鈉鹽
蠟狀芽孢桿 乙二四乙酸
乙二雙(2-氨基乙基)四乙酸四鈉
白淺灰鏈霉 乙二雙(2-氨基乙基)四乙酸
大腸埃希氏 順二酸鈉
嬰兒配方乳粉 蛋白質(zhì)、脂肪、乳糖 馬來酸
澳型核果褐腐病 對氨基鈉
納斯達(dá)短波單胞 對氨基
冷湖黃桿 反式-1,2-環(huán)己二四乙酸
釀酒酵母 棕櫚油酸
中國漢納酵母 莽草酸