商品介紹:
CEP-33779是一個新穎的,選擇性的JAK2抑制劑,IC50值為1.8±0.6nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1257704-57-6 純度:99.37% 分子量:462.57 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(CEP-33779)
英文名稱:CEP-33779
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
蘇云金芽胞桿菌蛋白磷4(抗原)Anti-GHRHR Antibody人轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
枯草芽孢桿菌一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因(抗原)Anti-GGH Antibody人轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)(ALT/GPT)
豚雙歧桿菌RRAD(多肽抗原)Anti-GHRL Antibody人天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)(GOT/GPT)
窄脊正青霉基質(zhì)衍生因子-1(抗原)Anti-GGA3 Antibody人天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)(GOT/GPT)
乳桿菌屬shank1多肽抗原Anti-GIMAP2 Antibody人肝脂(HL)
金針菇(毛柄金錢菌、冬菇)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族22成員17(多肽抗原)Anti-GIMAP2 Antibody人肝脂(HL)
根瘤菌可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5(抗原)Anti-GHSR Antibody人乙酰肝(HPA)
米曲霉溶質(zhì)攜帶物家族-1(抗原)Anti-GIMAP4 Antibody人乙酰肝(HPA)
少根根霉依賴鈉鈣交換蛋白6(抗原)Anti-GIMAP5 Antibody人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
意大青霉凋亡抑制因子的一種(抗原)Anti-GIMAP5 Antibody人Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)
串珠鐮孢核糖核蛋白抗原RO/SSA(抗原)Anti-GIT2 Antibody人纖維連接相關(guān)抗原(FRA)
德爾布有孢圓酵母干燥癥SSB/La蛋白Anti-GIT1 Antibody人纖維連接相關(guān)抗原(FRA)
球孢白僵菌Smad 2(抗原)Anti-GIT1 Antibody人胃泌抗體(GCA)
呂氏泰勒蟲(寧縣株)相關(guān)抗原5(多肽抗原)Anti-GJA3 Antibody人胃泌抗體(GCA)
枯草芽孢桿菌肺表面活性蛋白A(抗原)Anti-GJB7 Antibody人谷脫氫(GDH/GLDH)
蘋果鏈格孢滑膜凋亡抑制物1(抗體)Anti-GK Antibody人谷脫氫(GDH/GLDH)
沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體許旺酵母變種人結(jié)直腸癌細(xì)胞(干細(xì)胞庫保藏)
SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體馬克斯克魯維酵母人膀胱移行細(xì)胞癌
軸突導(dǎo)向因子SEMA6D抗體固囊酵母人甲狀腺癌細(xì)胞8305C(干細(xì)胞庫保藏)
組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD2抗體扣囊內(nèi)孢霉小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞
JAK2抑制劑(CEP-33779)出芽短梗霉 4-氨基-1-甲基-3-正基-1H-吡唑-5-甲酰
酮丁梭 葡萄籽提取物
果生鏈核盤 吡啶甲酸鉻
枯草芽孢桿 DL-甘油
氣單胞屬 苯并芘
地衣芽孢桿 鹽酸黃連水合物
熒光假單胞 鹽酸小檗堿
香菇 磷酸氫鈉
孟氏假單胞 戊二酸酐
貝萊斯芽胞桿 吡唑
黑曲霉 靛玉紅
蘇云金芽胞桿 高嶺土
Rhizobium miluonense 苯氧乙酸
中國平臍蠕孢
塊屬* 癸酸乙酯