公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PLD1和PLD2抑制劑(FIPI)
英文名稱:FIPI
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
FIPI是halopemide的衍生物,能夠有效抑制PLD1和PLD2,IC50值分別為25nM和20nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):939055-18-2 別名:5-Fluoro-2-indolyl deschlorohalopemide 純度:99.53% 分子量:421.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌分裂周期2樣蛋白激5抗體Human EIF5B ELISA Kit兔載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒
山柑芽孢桿菌CD20樣蛋白抗體(造血干4跨膜蛋白3)Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒
假單胞菌屬周期蛋白依賴性激CABLES1抗體Human ELP4 ELISA Kit兔誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
繩狀籃狀菌分裂周期相關(guān)蛋白3抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔游離睪(F-TESTO)免疫試劑盒
Bacillus 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體Human ELMOD2 ELISA Kit兔抑瘤M(OSM)免疫試劑盒
金針菇—HP3卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白153抗體Human EIF5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1) ELISA Kit兔乙?;囸I激(aGHRL)免疫試劑盒
黑孢霉卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160抗體Human ELOF1 ELISA Kit兔乙酰膽堿酯(AChE)免疫試劑盒
大腸埃希菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) ELISA Kit兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)免疫試劑盒
多主葡萄殼菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體Human ELP4 ELISA Kit兔乙酰膽堿(ACh)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體Human EIF5B ELISA Kit兔胰淀(Amylin)免疫試劑盒
瓜亡革菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體Human EMB ELISA Kit兔一氧化氮合成(NOS)免疫試劑盒
平菇腫瘤/抗原74抗體Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) ELISA Kit兔一氧化氮(NO)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體Human EMG1 ELISA Kit兔氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)免疫試劑盒
釀酒酵母7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體Human EIF3M ELISA Kit兔血小板選擇,P -選擇免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體Human EIF4A2 ELISA Kit兔血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體Human ELAC2 ELISA Kit兔血栓B2(TXB2)免疫試劑盒
猴頭菇Hericium erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSMAD3 ELISA Kit木栓
: =AS2.126資源名稱: 釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSMAD2 ELISA Kit麻醉椒苫
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:Ind GradeSHC轉(zhuǎn)化蛋白1試劑盒茅蒼術(shù)
PLD1和PLD2抑制劑(FIPI)布南色林英文名稱: Nystatin配對(duì)盒基因9抗體包裝1g
雌莫司汀磷鈉英文名稱: SULBENICILLINP-鈣粘附分子抗體包裝5g
醋唑英文名稱: Acetylspiramycin腺苷環(huán)化激活肽-38抗體包裝100mg
醋磺米英文名稱: Potassium trichloroammineplatinate(II)腫瘤抑制基因P53蛋白抗體(野生型P53)包裝5g
醋優(yōu)力司特;醋烏利司他英文名稱: Sisomicin腫瘤抑制基因p63α抗體包裝100mg
醋增血壓英文名稱: spectinomycin磷二酯4A8抗體包裝100g
地克珠利英文名稱: 5-MTHF;5-Methyltetrahydrofolic Acid Calcium Salt Trihydrate血小板源性生長(zhǎng)因子AB+BB抗體包裝25g
地拉考昔英文名稱: Kitasamycin增殖核抗原抗體包裝100g
地拉羅司,去鐵斯若英文名稱: josamycin腦特異性多肽蛋白19抗體包裝25g
地馬格列英文名稱: Midecamycin Acetate三磷腺苷門控陽(yáng)離子通道蛋白抗體包裝5g
地美司鈉英文名稱: Etimicin硫氧還蛋白過(guò)氧化物Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體包裝1g
地美溴英文名稱: Paromomycinp53凋亡相關(guān)作用蛋白PMP22抗體包裝250mg
地瑞那韋乙鹽英文名稱: Teicoplanin 磷核糖咪唑羧化抗體包裝100g
地塞米松環(huán)氧解物英文名稱: Nystatin神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體包裝25g
度骨化英文名稱: Inosine 5'-Monophosphate(IMP)腫瘤錯(cuò)配修復(fù)基因PMS1抗體包裝1g