產(chǎn)品屬性:
中文名稱:蛋白酶抑制劑(MLN9708)
英文名稱:MLN9708
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MLN2238能夠迅速水解成MLN2238,是有效的蛋白酶(proteasome)抑制劑,能夠抑制20S蛋白酶蛋白水解位點β5,IC50值為3.4nM,Ki值為0.93nM;同時可抑制β1和β2這兩個蛋白水解位點,IC50值分別為31和3500nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1239908-20-3 別名:Ixazomib citrate 純度:99.87% 分子量:517.12 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
諾爾斯氏鏈霉菌磷化DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體Human NDRG4 ELISA Kit前列腺D2(PGD2)
乳乳球菌乳亞種蛋白激MST抗體Human NDUFA5 ELISA Kit前列腺A1(PGA1)
棘托竹蓀磷化蛋白激MST抗體Human NDUFA7 ELISA Kit前列環(huán)(PGI2)
假蒼白桿菌磷化肌球蛋白輕鏈2抗體Human NDUFA8 ELISA Kit前列環(huán)(PGI)
臭曲霉髓鞘轉錄因子1抗體Human NDUFA9 ELISA Kit前顆粒蛋白(PGRN)
*枯草芽胞桿菌髓樣白血病-1抗體Human NDUFAF1 ELISA Kit前膠原C內肽增強子1(PCOLCE1)
球色單隔孢屬微管相關蛋白2抗體Human NDUFAF2 ELISA Kit前膠原C端肽(PCP)
產(chǎn)短桿菌肌增強因子2B抗體Human NDUFAF4 ELISA Kit前病整合位點1(Pim1)
孟氏假單胞菌心血管發(fā)育中胚層相關蛋白1抗體Human NDUFB11 ELISA Kit前白蛋白(PA)
球形副球菌轉移相關蛋白2抗體Human NDUFB1 ELISA Kit普通急性淋巴白血病抗原(CALLA)
空腸彎曲桿菌MYC結合蛋白2抗體Human NDUFB10 ELISA Kit葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)
弗氏鏈霉菌精/脯富含卷曲蛋白1抗體Human NDFIP1 ELISA Kit葡萄糖轉運蛋白3(GLUT3)
釀酒酵母微管相關蛋白9抗體Human NDUFB2 ELISA Kit葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)
產(chǎn)亞硝鹽馬杜拉放線菌有絲分裂驅動蛋白樣1抗體Human NDUFA4L2 ELISA Kit葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
雜色曲霉髓過氧化物抗中性粒胞質IgG抗體Human HCRT(Orexin) ELISA Kit葡萄糖氧化(GOD)
波蘭青霉兔抗小鼠IgA抗體Human NCOA5 ELISA Kit葡萄糖激調節(jié)蛋白(GKRP)
堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質量規(guī)格:>98%,BR番瀉苷B
噬冷菌(加詞待譯)Algoriphagus│zhangzhouensis 質量規(guī)格:>98%,BR番瀉苷A
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質量規(guī)格:>99%,BR和厚樸酚
蛋白酶抑制劑(MLN9708)乳酒假絲酵母 環(huán)庚甲胎蛋白Elisa
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 1,3-金剛烷二血清鐵蛋白Elisa
谷氨酸棒桿Ⅲ型 環(huán)己鹽酸鹽成纖維生長因子7Elisa
油葫蘆歐文氏 2,6-吡啶二羧酸類胰蛋白Elisa
糞銹傘 吡啶-3,5-二羧酸前列腺特異性抗原Elisa
Novosphingobium sp. 吡啶-2,4-二羧酸甘油三酯Elisa
馬賽 異酸游離甲狀腺Elisa
枯草芽孢桿 3-噻吩甲狂犬病IgA抗體Elisa
紫穗槐根瘤 2-氮雜雙環(huán)[2.2.1]庚-5-烯-3-酮皮質Elisa
白黃鏈霉 N-叔丁氧羰基咪唑狂犬病抗體Elisa
杰丁畢赤酵母 2(5H)-呋喃酮弓形蟲病Elisa
云南紅球 碳酰肼弓首蛔蟲Elisa
蘇云金芽孢桿馬來西亞亞種 3,4-二氨苯糖化血紅蛋白A1cElisa
紫色變異鏈霉 2-溴-4-氟糖聚糖Elisa
平菇PL-27 3-環(huán)己烯-1-甲酸抗狂犬病抗體Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)