PI3K和mTOR抑制劑(PF-04691502)公司*的產(chǎn)品：IL-23 人白介-23烯酯 分析標準品，≥99.5% (GC)
human PL-A2 (phospholipase A2) 人脂A2烯酯 >99.0%(GC)
Human visfatin 人內(nèi)臟脂肪烯酯 AR,99.0%
Humen IFN－ Alpha 人α－干擾烯酯 CP,98.0%
Humen IFN－ Be

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3K和mTOR抑制劑(PF-04691502)

英文名稱：PF-04691502

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

蠟樣芽胞桿菌乙肝病衣殼蛋白抗體Human SHC ELISA Kit大鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒

黑曲霉型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗體Human MUC20(Mucin-20) ELISA Kit大鼠6前列腺(6-K-PG)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌戊型肝炎病抗體Human SHE ELISA Kit大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)免疫試劑盒

灰肉色鏈霉菌HMG盒區(qū)內(nèi)含蛋白1抗體Human SH3PXD2A ELISA Kit大鼠5-羥色轉(zhuǎn)運體(5-HTT/SERT)免疫試劑盒

桑帕約氏酵母血紅蛋白theta亞型1抗體Human SH3GL3 ELISA Kit大鼠5羥色(5-HT)免疫試劑盒

屎腸球菌hbs1樣蛋白抗體Human HAAO(3-hydroxyanthranilate 3,4-dioxygenase) ELISA Kit大鼠5羥基乙(5-HIAA)免疫試劑盒

蛹蟲草*縮復合物亞型蛋白3抗體Human SH2D4A ELISA Kit大鼠5羥二十碳四烯(5-HETE)免疫試劑盒

鞘盒菌屬RNA結(jié)合蛋白39抗體Human SH3BGR ELISA Kit大鼠5'-核苷,胞膜(NT5E/CD73)免疫試劑盒

巨型艾美耳球蟲全色C合成抗體Human SH2D5 ELISA Kit大鼠5核苷(5-NT)免疫試劑盒

葡萄座腔菌血紅轉(zhuǎn)運蛋白1抗體Human SH3BGRL2(SH3 Domain Binding Glutamate Rich Protein Like 2 ) ELISA Kit大鼠5'-AMP活化蛋白激α-2催化亞基(PRKAA2)免疫試劑盒

金龜子綠僵菌小孢變種血紅轉(zhuǎn)運蛋白5抗體Human SH3BGRL3(SH3 domain-binding glutamic acid-rich-like protein 3) ELISA Kit大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒

栗疫菌造血信號轉(zhuǎn)導蛋白抗體Human SH3BP1 ELISA Kit大鼠4-羥基壬烯(HNE)免疫試劑盒

魯杰氏菌鹵脫鹵樣水解域內(nèi)含蛋白1A抗體Human SH2D2A ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌E3連接抑制受體抗體Human SH2D3A ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌His 結(jié)構(gòu)域內(nèi)含酪磷蛋白抗體Human SH2D3C ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒

炭疽芽胞桿菌多聚腺苷因子Clp1蛋白抗體Human AKR1B10(Aldo-keto reductase family 1 member B10) ELISA Kit大鼠Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒

根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品利卡靈-B

嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品去氫二異丁香酚

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,98.5%苷
PI3K和mTOR抑制劑(PF-04691502)鑲邊鏈霉 乙二 溶液脂肪酸轉(zhuǎn)運蛋白Elisa

泡盛曲霉變種 乙二脂肪酸結(jié)合蛋白Elisa

大腸埃希氏 正丁鋯鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白1Elisa

球孢白僵 2,5-二甲氧基苯酸鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白2Elisa

突孢毛殼 雙(基硅烷基)氨基鈉鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白3Elisa

淡紫擬青霉 丁二酸單乙酯鈉耦合中性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白4Elisa

新疆鹽地桿 鹽酸格拉司瓊L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體1Elisa

根癌土壤桿 Poly(D-lactide)L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體1Elisa

膜醭畢赤酵母 1,2-二硬脂?；?sn-三基-3-磷脂酰乙(DSPE)葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1Elisa

葡萄根瘤 N-Boc-L-異亮氨脂肪酸轉(zhuǎn)位Elisa

小腸腸球 2-三氟甲基-3-葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3Elisa

青霉屬 二氧化乙烯基環(huán)己烯葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4Elisa

醋桿屬 4-乙烯基環(huán)氧環(huán)己烷L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體3Elisa

圍小叢殼 乙酸鈉L型氨基酸轉(zhuǎn)運載體4Elisa

厚粉紅隔孢伏革 酮基膦酸二乙酯脂肪酸結(jié)合蛋白4Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)