商品介紹:
PTP1B-IN-1是PTP1B小分子抑制劑,IC50值為1.6mM,常作為類似物衍生的母核。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):612530-44-6 別名:PTP1B inhibitor 純度:99.58% 分子式:C?H?N?O?S 分子量:212.23 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
松鼠葡萄球菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA Kit
Pseudomonas batumici 組蛋白去甲基化JARID1B抗體Human PPP1CC ELISA Kit血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA Kit
少孢哈薩克斯坦酵母硫角質(zhì)抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血漿激肽釋放(KLKB1)ELISA Kit
玫煙色棒束孢角質(zhì)生長(zhǎng)因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human PPP2CA ELISA Kit血漿膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA Kit
Bacillus sp.離子通道蛋白G蛋白4抗體Human PPP2R1B ELISA Kit血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA Kit
海假交替單胞菌通道多聚體結(jié)構(gòu)域KCTD18抗體Human PPP2CB ELISA Kit血紅氧合2(HO-2)ELISA Kit
多主葡萄殼菌胞質(zhì)接頭蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血紅氧合1(HO-1)ELISA Kit
芽胞桿菌舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN抗體Human PPP1R10 ELISA Kit血紅加氧2(HO-2)ELISA Kit
多粘類芽孢桿菌內(nèi)流通道蛋白Kir4.1抗體Human PPP2R2A ELISA Kit血紅加氧1(HO-1)ELISA Kit
金黃色葡萄球菌金黃亞種樣蛋白3抗體Human PPP2R2B ELISA Kit血紅加氧(HO)ELISA Kit
釀酒酵母KLF樣轉(zhuǎn)錄因子7抗體Human PPP1R7 ELISA Kit血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌Kelch樣蛋白8抗體Human PPP3CB ELISA Kit血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA Kit
雞新城疫病血凝抑制試驗(yàn)(HI)陽(yáng)性血清離子通道蛋白家族KCNQ2抗體Human PPP1R8 ELISA Kit血紅蛋白α亞基(HB-α)ELISA Kit
黑曲霉離子通道多聚體結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human PPP3CC ELISA Kit血紅蛋白H(HbH)ELISA Kit
黃桿菌通道蛋白1抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血紅蛋白C(HbC)ELISA Kit
大斑凸臍蠕孢電壓門控通道蛋白1抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血紅蛋白(Hb)ELISA Kit
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)去氫木香內(nèi)酯
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)百秋李
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)β-胡蘿卜
PTP1B抑制劑(PTP1B-IN-1)Phospho-CDK9 (Thr186) 化周期依賴性激9抗體尿苷-5′-二鈉鹽 98%
CDKN1C/p57 Kip2 周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體溴烯 1.0 M THF溶液
Phospho-p57 Kip2 (Thr310) 化周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體烯溴化鎂 1.0M in THF
CGP-39/YKL-40 軟骨糖蛋白39抗體維生B6 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CEA 癌胚抗原抗體纈草烯 98%
CEA 癌胚抗原抗體D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酰-對(duì)- 98%
CEA 癌胚抗原單克隆抗體(包被)3-環(huán)氧-7-氧雜二環(huán)[4,1,0]庚烷 96%
CEA 癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))木糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品