產(chǎn)品屬性:
中文名稱:中性紅染色液(活細胞專用)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
用途: 用于外周血細胞的活體染色,也可以用于其它活體細胞或組織的染色。 注意事項: 細胞核染成紅色,細胞核中的核酸呈酸性,因此細胞核會被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環(huán)境,因此溶酶體也是可以被中性紅染色液染成紅色的。 儲存條件:室溫,12個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
牛角粉(標準品)英文名稱: Laminarin from Laminaria digitataγ-谷酰轉(zhuǎn)肽5輕鏈抗體包裝5g
翁花(標準品)英文名稱: Pancreatinγ-谷酰轉(zhuǎn)肽7輕鏈抗體包裝50mg
仙苷(標準品)英文名稱: Papain溶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體包裝1g
楊苷(標準品)英文名稱: Papain糖原合激3α+β抗體包裝5g
楊梅根(標準品)英文名稱: PancreatinG2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
楊酯(標準品)英文名稱: Pancreatin生長分化因子8/肌肉抑制抗體包裝5g
蛭(螞蟥)(標準品)英文名稱: Orphenadrine citrate磷化糖原合激3α/β抗體包裝25g
絲瓜甙B英文名稱: β-GalactosidaseSEC63域內(nèi)含蛋白1抗體包裝5g
絲石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖酯英文名稱: Abscisic acid,S-ABAA型病H7N9 M1蛋白抗體包裝1g
斯皮諾(標準品)英文名稱: Abscisic acid,S-ABA人類狀瘤病33 E6蛋白抗體包裝5g
四氫小檗堿(標準品)英文名稱: Abscisic acid,S-ABABeta基己糖苷beta亞基蛋白A鏈抗體包裝10MG
四氫鴨腳木堿英文名稱: PEPSIN磷化熱休克蛋白-70抗體包裝100g
松柏;4-羥基-3-氧基肉桂(標準品)英文名稱: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化熱休克蛋白-70抗體包裝25g
松果菊苷(標準品)英文名稱: Andarine19號染色體開放閱讀框38抗體包裝5g
松苓新英文名稱: PEPSIN乙酰肝抗體包裝10mg
光滑假絲酵母Candida│glabrata 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR末端補體復(fù)合物C5b-9試劑盒雷公藤內(nèi)酯;Triptolide,14
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標準品膜內(nèi)?;脑噭┖新仿吠?Liquidambaric a
雷夫松氏菌Leifsonia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,蛋白≤0.1%膜聯(lián)蛋白A2試劑盒利卡靈-B;(-)-Licarin B
中性紅染色液(活細胞專用)硬結(jié)節(jié)桿 4-甲基鄰苯二白關(guān)聯(lián)球蛋白樣受體1Elisa
鞘氨 4-氟-2-甲白關(guān)聯(lián)球蛋白樣受體2Elisa
*灰葡萄孢 甘油縮甲γ谷氨酰轉(zhuǎn)移Elisa
糞腸球 3-溴-5-甲酸甲酯(易)酪氨酸激受體BElisa
毛霉屬 環(huán)戊基苯酸β位淀粉樣前體蛋白裂解2Elisa
弓形蟲(GJS-3株) 鹽酸特拉唑磷酸化蛋白激C亞性D型Elisa
北京擲孢酵母 2-甲氧基-6-甲基吡啶突觸核蛋白βElisa
蓋替隱球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮氨酸豐富重復(fù)G蛋白偶聯(lián)受體5Elisa
淺灰小雙孢 1-(4-吡啶基)酮激錨定蛋白4Elisa
廣西腐霉 3-氨基-2-氯吡啶緊密連接蛋白4Elisa
黑曲霉 4-環(huán)己酮羧酸甲酯可溶性Klotho蛋白Elisa
空腸彎曲桿 5-氯-1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不飽和脂肪酸Elisa
近緣毛殼 3-乙酰氨基鄰苯二甲酸酐飽和脂肪酸Elisa
鞘氨桿 1,7-二氯-4-氧雜庚烷人可溶性EndoglinElisa
釀酒酵母 5-氯香草酸蛋白激D2Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)