商品介紹:
Necrosulfonamide是一個MLKL藥理抑制劑,在HT-29細(xì)胞的IC50是124nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1360614-48-7 純度:98.00% 分子量:461.47 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MLKL藥理抑制劑(Necrosulfonamide)
英文名稱:Necrosulfonamide
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
地衣芽胞桿菌組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MOF抗體Human NOC4L ELISA Kit去加壓/1-去基-8-右旋-精加壓(dDAVP)
后藤假絲酵母間質(zhì)蛋白抗體Human NOB1 ELISA Kit趨化因子受體3(CCR3)
大腸桿菌肌球蛋白輕鏈3抗體Human NOD2(Nucleotide-binding oligomerization domain-containing protein 2) ELISA Kit趨化因子配體17(CXCL17)
詹氏桿菌多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體Human HSP90B1(Endoplasmin) ELISA Kit趨化因子CXCL16(CXCL16)
釀酒酵母同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human NOC4L ELISA Kit趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)
鏈格孢增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體Human NINJ2 (Ninjurin-2) ELISA Kit趨化因子26(CCL26)
厚垣孢普可尼亞菌肌鈀蛋白抗體Human NIPBL ELISA Kit趨化因子2(CXCL2)
露濕漆斑菌肌管相關(guān)蛋白2抗體Human HP(Haptoglobin) ELISA Kit趨化因子(fractalkine/CX3CL1)
乳片球菌基質(zhì)金屬蛋白18/19抗體Human NKRF ELISA Kit趨化因子(FK)
不吸水鏈霉菌增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體Human NKIRAS2 ELISA Kit趨化因子(CCL5/RANTES)
芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激激激4抗體Human NKTR ELISA Kit驅(qū)動蛋白家族成員27(KIF27)
貝倫格葡萄座腔菌神經(jīng)分化因子6抗體Human NEDD4 ELISA Kit清道夫受體類B成員1(SCARB1)
白被黑蛋巢同源盒蛋白Meis2抗體Human PTHLH(PaRathyroid hormone-related protein) ELISA Kit清道夫受體B(SRB/CD36)
根瘤菌Meteorin神經(jīng)膠質(zhì)分化調(diào)節(jié)蛋白抗體Human NLRP2 ELISA Kit輕鏈鐵蛋白(L-ferritin)
嗜乳桿菌棕櫚?;さ鞍?/span>5抗體Human NEDD4L ELISA Kit青少年2型血色沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2(HFE2)
中慢生華癸根瘤菌腦蛋白239抗體Human NFIB ELISA Kit親環(huán)蛋白A(PPIA/CYPA)
百合科Colletotrichum│liliacearum (Westend.) Duke 質(zhì)量規(guī)格:用于蛋白質(zhì)組分析,用于高效液相色譜標(biāo)記,熒光染料,用于質(zhì)譜的衍生化試劑積雪草苷
ATCC33326=BCRC13358=CBS306.61=DSM43838=IF資源名稱: 玫瑰小雙孢菌玫瑰亞種 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)D-(+)-木糖
異常漢遜酵母Hansenula│anomala 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)異鼠李
MLKL藥理抑制劑(Necrosulfonamide)米曲霉 芐基三乙基溴化銨(TEBA)甲狀旁腺Elisa
本鄉(xiāng)鵝膏 4-埃立克體Elisa
植物乳桿 3′-氨基-4′-乙酰苯埃立克體抗體Elisa
橙色桿狀 N-Boc-1,6-二氨基己烷尿氨酸Elisa
林生地霉 4-甲基-2-酮基戊酸鈣弓蛔蟲病IgM抗體Elisa
門多薩假單胞 雙(叔丁氧羰基)弓蛔蟲病IgG抗體Elisa
紅色皺紋單胞 紅熒烯細(xì)粒棘球絳蟲糞抗原Elisa
黃色籃狀 2-乙?;?細(xì)小病IgG抗體Elisa
擬粉紅鎖擲孢酵母 4-溴-1-瘟熱病IgG抗體Elisa
草菇 N-代丁二酰亞超敏心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
梭 1-溴-4-戊苯超敏心肌特異性肌鈣蛋白TElisa
雙核絲核 4-溴-2-氟甲苯內(nèi)Elisa
海南根瘤 3,5-二副流感病Elisa
滑菇 2,3-二溴-1-烯轉(zhuǎn)化生長因子αElisa
木賊鐮孢 (S)-(+)-1-(2-吡咯烷甲基)吡咯烷轉(zhuǎn)化生長因子βElisa