MAP4K4抑制劑(GNE-495)公司*的產(chǎn)品：D2R(Human dopamine D2 receptor) ELISA Kit 人多巴D2受體1,2,4-苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1mg/ml ，用于水質(zhì)分析
EM-2(Human endomorphin-2) ELISA Kit 人內(nèi)肽-22,2,6--4H-1,3-二噁英-4-酮 90%
Alpha-EP(Human Alpha-Endomo

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MAP4K4抑制劑(GNE-495)

英文名稱：GNE-495

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

馬泰勒蟲（青海剛察株）成熟T淋巴增殖蛋白1抗體Human NR2C1(Nuclear receptor subfamily 2 group C member 1) ELISA Kit犬尿(KYN)

枯草芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激8相互作用蛋白1抗體Human NR2B ELISA Kit糖還原(AR)

牛瘟病肌球蛋白輕鏈6抗體Human NOVA2 ELISA Kit縮(ALD)

副結(jié)核補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（-）陰性血清磷化肌增強(qiáng)因子2C抗體Human F2R(Proteinase-activated receptor 1) ELISA Kit固(ALD)

土壤短芽胞桿菌磷化黑色瘤粘附分子CD146抗體Human NOX3(NADPH oxidase 3) ELISA Kit全段甲狀旁腺(i-PTH)

琥珀乳牛肝菌肌增強(qiáng)因子2C抗體Human NOXA2/p67phox ELISA Kit去乙?；疭irtuin-7(SIRT7/SIR2L7)

大腸埃希菌促黑激γ1抗體Human NMUR1 ELISA Kit去乙?；疭irtuin-6(SIRT6/SIR2L6)

干酪乳桿菌小鼠抗激-M2抗體Human NNT ELISA Kit去乙?；疭irtuin-5(SIRT5/SIR2L5)

貝萊斯芽胞桿菌甲基化多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體Human NPAS1 ELISA Kit去乙酰化Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)

灰離褶傘有絲分裂原誘導(dǎo)基因6抗體Human NNT ELISA Kit去乙?；疭irtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)

平菇線粒體融合蛋白Mfn2抗體Human NMUR1 ELISA Kit去乙酰化Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)

地衣芽孢桿菌珠蛋白1抗體Human NOXA2/p67phox ELISA Kit去乙?；囸I激(dGHRL)

迂回殼囊孢肌球蛋白輕鏈9抗體Human NPAS1 ELISA Kit去唾液糖蛋白受體(ASGPR)

香菇磷化肌球蛋白輕鏈9抗體Human NO66/C14orf169 ELISA Kit去唾液糖蛋白受體(AGSPR)

雙孢蘑菇(白蘑菇、洋蘑菇)NADH復(fù)合體1抗體Human NPAS3 ELISA Kit去甲腎上腺(NE)

雙環(huán)林地蘑菇癌相關(guān)抗原抗體Human NOB1 ELISA Kit去甲腎上腺(NA)

微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑羥基積雪草

紅曲霉Monascus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：pH指示劑積雪草

紅球菌Rhodococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T)羥基積雪草苷
MAP4K4抑制劑(GNE-495)奇異翅孢殼 二苯基酸-2-氨基乙酯瘟熱病抗體Elisa

異常漢遜酵母 4-溴單核趨化蛋白1Elisa

健康兔血清 2-基-4-甲氧基-6-甲基-1,3,5-三半乳糖凝集3Elisa

膠孢 辛可尼定硫酸鹽二水合物瘟熱病Elisa

葉際類芽孢桿 6-溴細(xì)小病抗原Elisa

氮還原類芽胞桿 4-基-4'-戊氧基聯(lián)苯傳染性肝炎病抗體Elisa

大毛霉 2-基-3,3-二苯基烯酸乙酯布魯氏桿抗體Elisa

頭葡萄球 5,7-二溴-8-羥基喹啉表皮生長(zhǎng)因子Elisa

鏈霉 3-氨基-2-甲酸促甲狀腺Elisa

短小芽胞桿 1,2-萘醌-4-磺酸鈉鹽狂犬病IgG抗體Elisa

阿薩希絲孢酵母 三氟甲磺酸釔(III)鉤端螺旋體抗體Elisa

葡萄糖桿屬 三氟甲磺酸鑭布病抗體Elisa

小笠原德克斯酵母 (4S,5S)-(-)-4-甲氧甲基-2-甲基-5-苯基-2-惡唑啉N端前腦鈉Elisa

米根霉 N-(3-二甲氨基基)甲基烯酰促紅生成Elisa

芬氏纖維微 4-(1-吡咯烷)苯甲對(duì)稱二甲基氨酸Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)