以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Enazadrem是有效的5-脂氧合酶(5-lipoxygenase)抑制劑,具有抗炎功效。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):107361-33-1 純度:97.26% 分子量:299.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
楊鏈格孢蕈堿型乙酰膽堿受體M2抗體Human ADAMTS4(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4) ELISA Kit人谷[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)抗體免疫試劑盒
耶納農(nóng)球菌促進(jìn)凋亡基因抗體Human CHRM3(Muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA Kit人谷[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)免疫試劑盒
Paenibacillus agarexedens原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體Human KSR2(Kinase suppressor of Ras 2) ELISA Kit人孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
香栓孔菌死亡活化蛋白抗體Human VCL(Vinculin) ELISA Kit人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)免疫試劑盒
釀酒酵母角蛋白19抗體Human VCAN(Versican core protein) ELISA Kit人鉤端螺旋體IgG(Leptospira)免疫試劑盒
木蘭假絲酵母角蛋白2抗體Human KRT17(KeRatin, type I cytoskeletal 17) ELISA Kit人弓蛔蟲(Tc)抗體(IgG)免疫試劑盒
青霉屬角蛋白4抗體Human TNNT1(Troponin T, slow skeletal muscle) ELISA Kit人庚型肝炎病抗體(IgM)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌色b245輕鏈抗體Human S100A9(Protein S100-A9) ELISA Kit人庚型肝炎病(HGV)抗原免疫試劑盒
乳粉 克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)(定量) 5號(hào)染色體開放閱讀框44抗體Human NFKB1(Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit) ELISA Kit人庚型肝炎病(HGV)抗體(IgG)免疫試劑盒
節(jié)桿菌屬心臟特異性絲蛋白抗體Human S100A8(Protein S100-A8) ELISA Kit人睪(T)免疫試劑盒
盤多毛孢胞漿型磷脂A2抗體Human CA1(Carbonic anhydrase 1) ELISA Kit人高香草(HVA)免疫試劑盒
變異鏈霉菌周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human NMS(Neuromedin-S) ELISA Kit人高危型狀瘤病衣殼蛋白L1(HR-HPVL1)抗體(IgG)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌神經(jīng)粘附分子1抗體Human TPT1(Translationally-controlled tumor protein) ELISA Kit人高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌緊密連接蛋白5抗體Human MCM2(DNA replication licensing factor MCM2) ELISA Kit人高糖基化人絨毛膜促性腺激(hCG)免疫試劑盒
亮桿菌屬富含半胱運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體Human IL32(Interleukin-32) ELISA Kit人高敏狀腺原(u-T3)免疫試劑盒
釀酒酵母角蛋白5+6抗體Human S100A6(Protein S100-A6) ELISA Kit人高敏甲狀腺(u-T4)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%纈草三酯
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品異性南五味子丁
尼安薩沙門氏菌Salmonella│nyanza 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%乙酰哈巴苷
5-lipoxygenase抑制劑(Enazadrem)睪(T)檢測試劑盒英文名稱:T ELISA Kit載脂蛋白C1抗體包裝1g
高鐵血紅蛋白(MHB)檢測試劑盒英文名稱:MHB ELISA Kit載脂蛋白C2抗體包裝5g
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測試劑盒英文名稱:HMGB-1 ELISA Kit載脂蛋白L1抗體包裝1g
高遷移率族蛋白1(HMGB1)檢測試劑盒英文名稱:HMGB1 ELISA Kit載脂蛋白L4抗體包裝5g
高敏三碘狀腺原(u-T3)檢測試劑盒英文名稱:u-T3 ELISA Kit載脂蛋白L5抗體包裝100g
高敏狀腺(u-T4)檢測試劑盒英文名稱:u-T4 ELISA Kit載脂蛋白M抗體包裝25g
高密度脂蛋白膽固(HDL-C)檢測試劑盒英文名稱:HDL-C ELISA Kit載脂蛋白O抗體包裝500g
高靈敏度促狀腺(U-TSH)檢測試劑盒英文名稱:U-TSH ELISA Kitβ淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
高爾基蛋白73(GP-73)檢測試劑盒英文名稱:GP-73 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體包裝1g
高半胱(Hcy)檢測試劑盒英文名稱:Hcy ELISA Kit三號(hào)染色體開放閱讀框抗體包裝1g
干燥綜合征抗原B(SSB)檢測試劑盒英文名稱:SSB ELISA Kit腺嘌呤磷核糖轉(zhuǎn)移抗體包裝1g
干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)檢測試劑盒英文名稱:SCF/MGF ELISA Kit磷化通道蛋白2抗體包裝25g
干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)檢測試劑盒英文名稱:IP-10/CXCL10 ELISA KitADP核糖基化因子1抗體包裝5g
干擾調(diào)節(jié)因子5(IRF5)檢測試劑盒英文名稱:IRF5 ELISA Kit乙型肝炎病X相關(guān)蛋白2抗體包裝1g
肝脂(HL)檢測試劑盒英文名稱:HL ELISA KitADP核糖基化因子5抗體包裝5g